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乳酸(LD)测试盒(测全血)/比色法
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乳酸(LD)测试盒(测全血)说明书
一、测定原理:
以 NAD+ 为氢受体,LDH 催化乳酸(Lactic Acid )脱氢产生丙酮酸,使 NAD+ 转化成NADH。其中 PMS 递氢使 NBT 还原为紫色呈色物,呈色物的吸光度在 530nm 时与乳酸含量成线性关系。
二、试剂组成及配制:
蛋白沉淀剂:
溶液 50ml×1 瓶,室温保存 6 个月,如有结晶,则取上清进行实验。
试剂一:酶稀释液 60ml×1 瓶, 4℃~8℃冰箱保存 6 个月。
试剂二:酶贮备液 0.6 ml×1 支, 4℃~8℃冰箱保存 6 个月;用时用一次性吸头进行取样。
酶工作液的配制:临用前将试剂二(酶贮备液)和试剂一(酶稀释液)按照 1︰100 的体积比进行混合,
现用现配,4℃保存 24 小时内有效;
试剂三:显色溶液 6 ml×2 瓶, 4℃~8℃避光冰箱保存 6 个月。
试剂四:粉剂×2 支,短期内使用可放 4℃~8℃冰箱,长期(6 个月)存放请置-20℃以下。
显色剂的配制:使用前取试剂四粉剂 1 支倒入 1 瓶试剂三液体中,待粉剂全部溶解后,
用微量移液器取少许液体打入小离心管中,反复颠倒离心管,再用微量移液器将离心管中的液体转移到瓶中,如此反复 2~3 次,使二者充分混合,配成显色剂,4℃~8℃冰箱避光保存。
试剂五:终止液,60 ml×2 瓶, 4℃~8℃冰箱保存 6 个月。
试剂六:3mmol/L 标准液,2 ml×1 支, 4℃~8℃冰箱保存 6 个月。
三、操作步骤:
1、前处理:
上清液制备:取待测样本 0.1ml,加入蛋白沉淀剂 0.6ml 混匀,3500~4000 转/分,离心 10 分钟,取上清液进行测定。
[注]:1、全血及时用蛋白沉淀剂制备成乳酸上清液。
2、制成的乳酸上清冰箱 4℃或者 0℃以下保存,15~30 天稳定不变。
3、如果您的血样很少,您可以取 0.05ml 全血加 0.3ml 蛋白沉淀剂。
2、操作表:


四、注意点:
1、应取空腹或静止状态下的静脉血,并避免血液淤滞,如用止血带,应在针头刺入静脉后马上放开,然后等 2 分钟后再抽血。
2、血液要新鲜,是当天完成,如果当天完不成,可将样本进行样本前处理后,将上清液 4℃或-20℃保存可稳定 15~30 天。
3、蛋白沉淀剂如有结晶, 则取上清进行实验。
4、在批量实验前需要进行预实验,以确定测定绝对 OD(测定 OD 值-空白 OD 值)在 0.05~0.35 之间。如果测定绝对 OD 小于 0.05,则需要加大样本浓度重新测定;如果测定绝对 OD 大于 0.35,则需要将样本稀释后重新测定。
1、前处理:
将 6mmol/L 的乳酸标准用双蒸水稀释成不同浓度:1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L、4mmol/L、5mmol/L、6mmol/L,进行标准曲线的制备。
2、操作表:

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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