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线粒体呼吸链复合物I测试盒
价格：￥ 7200
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:43
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线粒体呼吸链复合物I测试盒说明书
一、反应原理
线粒体呼吸链复合物 I，通常称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸辅酶 Q 还原酶（reduced nicotinamide adenine
dinucleotide coenzyme Q reductase, NADH-CoQreductase），又称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶
（reduced nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase；NADH dehydrogenase），是线粒体电子传递链中
最大的结构成分：含有 30 至 40 多个多肽结构。其特征性的酶活性是鱼藤酮敏感的 NADH－辅酶 Q 还原酶
（NADH:Q Reductase）。
复合物 I 催化线粒体内电子由供体 NADH 传递到内膜上辅酶 Q 受体（泛醌；ubiquinone）的能量转移反应，
为整个呼吸链反应系统的步。
基于辅酶 Q 底物，在鱼藤酮存在与否的情况下，通过 NADH－辅酶 Q 还原酶的催化，转化成还原型泛醌
（CoQH2），同时还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）转化为
氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adeninedinucleotide；NAD），在分光光度仪下产生吸收峰值的
变化（340nm 波长），由此定量测定 NADH－辅酶 Q 还原酶的特异活性。其反应系统是：
二、试剂组成：
三、保存方式：
-20℃冰箱保存，避免反复冻融；反应液（Reagent B）含有毒性物质，避免直接用手接触；反应液（ReagentB）和底物液（Reagent D），避免光照，有效保证 6 月
四、用户自备：
比色皿：用于比色分析的容器
双波长分光光度仪：用于比色分析
培养箱：用于孵育反应物
五、实验步骤：
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液置入冰槽里融化；缓冲液（Reagent A）室温预热；反应液（Reagent B）和底物液（Reagent D）注意避光。然后进行下列操作。
（一）、背景对照测定
1、移取 780 微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿
2、加入 100 微升反应液（Reagent B）
3、加入 20 微升底物液（Reagent D）
4、放进 30℃培养箱里静置 3 分钟
5、加入 100 微升阴性液（Reagent C）
6、上下倾倒数次，混匀（限定在 3 秒之内）
7、即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照：（340 波长读数－380 波长读数）0 分钟－（340 波长读数－380 波长读数）1 分钟或 3 分钟
（二）、样品总活性测定
1、移取 780 微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿
2、加入 100 微升反应液（Reagent B）
3、加入 20 微升底物液（Reagent D）
4、放进 30℃培养箱里静置 3 分钟
5、加入 100 微升待测样品（注意：10 微克总线粒体蛋白）
6、上下倾倒数次，混匀（限定在 3 秒之内）
7、即刻放进分光光度仪检测，此为样品总活性读数：（340 波长读数－380 波长读数）0 分钟－（340 波长读数－380 波长读数）1 分钟或 3 分钟
（三）、样品非特异活性测定
1、移取 760 微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿
2、加入 100 微升反应液（Reagent B）
3、加入 20 微升专性液（Reagent E）
4、加入 20 微升底物液（Reagent D）
5、放进 30℃培养箱里静置 3 分钟
6、加入 100 微升待测样品（注意：10 微克总线粒体蛋白）
7、上下倾倒数次，混匀（限定在 3 秒之内）
8、即刻放进分光光度仪检测，此为样品非特异活性读数：（340 波长读数－380 波长读数）0 分钟－（340波长读数－380 波长读数）1 分钟或 3 分钟
六、样品活性计算
（1）、样品活性（总活性或非特异活性）
（样本读数 - 背景读数）×体系容量（1ml）×样本稀释倍数 ÷样本蛋白浓度样本容量（0.1ml）×5.5（毫摩尔吸光系数）×反应时间（1 或者 3 分钟） （mgprot/ml）单位：µmol NADH/min/mgprot
（2）、样品特异活性
样品总活性－样品非特异活性＝样品特异活性
（蛋白浓度可通过用总蛋白定量考马斯亮蓝法试剂盒测定）
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：线粒体呼吸链,线粒体呼吸链复合物I测试盒,线粒体呼吸链复合物I
