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铜-ATP酶(Cu-ATPase)测试盒/比色法
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货号:XYP9093008
铜-ATP酶(Cu-ATPase)测试盒说明书
一、测定原理:
ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及无机磷,测定无机磷的量可判断 ATP 酶活力的高低。Cu2+-ATPase 酶是一种能被钾激活而可被钒酸抑制的酶。
二、试剂组成与配制:


0.5µmol/ml 标准磷应用液配制:按贮备液:双蒸水=1︰19 的比例稀释,即取 0.5ml 贮备
液加双蒸水定容至 10ml。
定磷剂的配制:按 H2O:2.5mol/L 硫酸:试剂八:试剂九=2︰1︰1︰1 的比例及先后顺序配制,
配好的定磷剂应为浅黄色,若无色则试剂失效,若蓝色则为磷污染,定磷剂需现用现配,需多少配多少。
(注意:配制试剂时,双蒸水、容器等要防止磷污染。)
四、操作步骤:
1、样本前处理:
准确称取组织重量,按重量(g)︰体积(ml)=1︰9 的比例,加入 9 倍体积的生理盐水,冰水浴条件下
机械匀浆,制备成 10%的组织匀浆,2500 转/分,离心 10 分钟,取得的上清液再用生理盐水按 1︰4 稀
释制备成 2%的组织匀浆。(具体操作见我所《实验方法学》)
2、酶促反应:
3、定磷
六:计算及举例:
1、定义:
规定每小时每毫克组织蛋白的 ATP 酶分解 ATP 产生 1 mol 无机磷的量为一个 ATP酶活力单位,即微摩尔磷/毫克蛋白/小时(molPi/mgprot/hour)
2、计算公式:

[注]:*反应时间为 10 分钟,酶活力定义为 1 小时,故乘以 6
**稀释倍数= 130 +80+ 40 +40 + 40 +100 +50 =4.8 倍
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:铜-ATP酶(Cu-ATPase),铜-ATP酶(Cu-ATPase)测试盒,比色法
















