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乙酰胆碱酯酶(A-CHE)测试盒
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详细内容
货号:XYP9093047
乙酰胆碱酯酶(A-CHE)测试盒说明书
一、测定原理:
乙酰胆碱酯酶(Acetyl choline esterase)水解乙酰胆碱生成胆碱及乙酸,胆碱可以与巯基显色剂反应生成 TNB(对称三硝基苯,Sym-Trinitrobenzene)黄色化合物,根据颜色深浅进行比色定量,水解产物胆碱的数量可反应胆碱酯酶的活力。
二、试剂组成及配制:
试剂一:标准品,粉剂×3 支,4℃保存 6 个月。 1mol/ml
标准品应用液配制:取标准品一支加生理盐水 10ml 混匀,现用现配。
试剂二:底物,粉剂×2 支,4℃保存 6 个月。
底物缓冲液配制:用时每支粉剂加生理盐水 20ml,制备成底物缓冲液,4℃保存两周。
试剂三:显色剂贮备液,3ml×1 支,4℃保存 6 个月。
显色应用液配制:用时按照显色剂贮备液:生理盐水=1︰9 稀释,配成显色应用液。按需配制,也可一次配制 30ml,避光冷藏 3 个月。
试剂四:抑制剂,液体 2ml×1 支。打开后装在空的小塑料瓶内(附空瓶一只),室温保存 6 个月。
试剂五:透明剂,液体 6ml×1 支,室温保存 6 个月。天冷时会有沉淀或混浊,须在 37℃水浴加热至透明后方可使用。
生理盐水:60ml×2 瓶,室温保存 6 个月。
三、操作过程:
1、样品前处理:
组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍体积的生理盐水,冰水浴
条件下机械匀浆,2500 转/分,离心 10 分钟,取上清液待测(同时取部分上清测定蛋白浓度,蛋白定量
试剂盒本所有售)。
血清(浆):取不抗凝或抗凝全血 1000~1500 转/分,离心 8 分钟,取上层血清(浆)。一般测定时将
血清或血浆用生理盐水 1︰9 稀释(具体稀释浓度以预实验结果为准)。
全血样本:取 0.1ml 抗凝全血加双蒸水至 10ml,即按 1︰99 稀释,充分混匀。如果您的样本量很少,可
以减少取样量。例如取 0.01ml 或 0.02ml 抗凝全血加双蒸水至 1ml 或 2ml。取 a ml(一般为 0.1ml)进
行检测,每个样本取样前必须充分混匀。
2、操作步骤:
注:a*所表示所取的样品量、标准品量、双蒸水的量,三者均相等:
①、血清(浆)测试前用生理盐水 10 倍稀释,参考取样量为 30~50 l。
②、10%脑组织匀浆的参考取样量为 30~50 l。
③、1:99 稀释后的全血稀释液取 0.1ml,取样前每只要摇匀。
三、计算公式及举例:
(一)、组织匀浆中乙酰胆碱酯酶的计算:
1、单位定义:
每毫克组织蛋白在 37ºC 保温 6 分钟,水解反应体系中 1mol 基质为 1 个活力单位。
3、计算公式:
(二)、血清中乙酰胆碱酯酶的计算:
1、单位定义:
每毫升血清样本在 37ºC 保温 6 分钟,水解反应体系中 1mol 基质为 1 个活力单位。
2、计算公式:

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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