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还原型谷胱甘肽(GSH)测试盒/微板法
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还原型谷胱甘肽(GSH)测试盒说明书
一、测定原理:
二硫代二硝基苯甲酸与巯基化合物反应时能产生一种黄色化合物,可进行比色定量测定。
二、试剂组成与配制:
试剂一:甲粉×1 瓶,乙液 50ml×1 瓶,4℃保存 6 个月。甲粉:加 90~100℃的热双蒸水 170ml,充分完全溶解;
试剂一应用液的配制:将已配好的甲液与乙液充分混合。此为过饱和溶液,室温静置冷却后,如
有结晶,则取上清进行实验,室温保存 6 个月。
试剂二:粉剂×1 瓶,用时加双蒸水至 200ml 溶解,用我所赠送的塑料瓶室温保存 6 个月。
试剂三:粉剂×1 支,用时加双蒸水至 50ml 溶解,避光 4℃保存 6 个月。
试剂四:粉剂×4 支,用时每支加双蒸水 10ml 溶解,避光冷藏可保存 5 天。
试剂五:GSH 标准品粉剂 3.07mg×3 支,4℃保存 6 个月。
试剂六:GSH 标准品溶剂贮备液 10ml×1 瓶,4℃保存 6 个月。
GSH 标准品溶剂应用液的配制:按 GSH 标准品溶剂贮备液:双蒸水=1:9,加入 9 倍体积的双蒸水进行稀释,现用现配。
1mmol/L GSH 标准品溶液的配制:GSH 的分子量为 307,每次测定前将 3.07mg 的 GSH 标准品加入到 10ml的 GSH 标准品溶剂应用液中,混匀,现用现配。
20µmol/L GSH 标准品溶液的配制:取 1mmol/LGSH 标准品溶液 0.2ml 加入 GSH 标准品溶剂应用液9.8ml, 现用现配。
三、操作步骤
1、上清液的制备:取待测样本 0.5ml,加试剂一应用液 2ml 混匀,3500~4000 转/分离心 10 分钟,取上清液 1ml 进行显色反应。
2、显色反应:



四、注意事项:
1、血液中的 GSH 几乎全部存在于红细胞内,可以用每升全血中 GSH 的克数来表示,也可用每克 Hb
中 GSH 的含量来表示。
2、计算时应用消光系数,故比色计要校正波长。用标准管计算较方便、准确。
3、吸取上清时,用带刻度的 5ml 滴管,或者用移液器,避开表面的一层薄膜,插到上清液中吸取 2ml做显色反应。
4、每批试验做 2 个标准管、空白管,以减少操作误差。
五、测定意义:
谷胱甘肽(GSH)是一种低分子清除剂,它可清除 O2-、H2O2、LOOH。谷胱甘肽是谷氨酸、甘氨酸和半胱氨酸组成的一种三肽,是组织中主要的非蛋白质的巯基化合物,并且是GSH—PX 和 GST 两种酶类的底物,为这二种酶分解氢过氧化物所必需,它并且能稳定含巯基的酶和防止血红蛋白及其它辅因子受氧化损伤,最近还证明 GSH 也参与使维生素 E 恢复到还原态的作用,缺乏或耗竭 GSH 会促使许多化学物质或环境因素产生中毒作用或加重其中毒作用,这可能与增加氧化损伤有关,因而 GSH 的量的多少是衡量机体抗氧化能力大小的重要因素。
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热门标签:还原型谷胱甘肽(GSH),还原型谷胱甘肽(GSH)测试盒,微板法
















