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HEK-293A-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:49
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详细内容
HEK-293A-RFP-Puro稳转株
英文名称 | HEK-293A-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1518 |
中文名称 | RFP 标记的 HEK-293A 稳转株 |
Lot number | HEK-293A-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
1. 基础细胞系：HEK-293A
来源：源自人胚肾细胞，经腺病毒 5 型 DNA 转化，具有贴壁生长特性，常用于重组蛋白表达、病毒包装（如慢病毒、腺病毒）及基因编辑研究。
优势：
转染效率高，适合外源基因的稳定表达；
培养条件相对简单，增殖速度快，适合大规模扩增。
2. 关键标记：RFP（红色荧光蛋白）
功能：作为报告基因，用于实时监测细胞状态、转染效率或示踪细胞在体内外的分布。
特点：
激发波长约 558 nm，发射波长约 583 nm，荧光信号强且稳定；
与 GFP（绿色荧光蛋白）等其他荧光标记兼容，可用于多色荧光实验。
3. 筛选标记：Puro（嘌呤霉素）
作用：用于筛选成功整合外源基因的细胞克隆。
机制：
稳转株通过质粒或病毒载体导入含嘌呤霉素抗性基因的表达盒；
在嘌呤霉素存在的培养基中，未成功转染的细胞会被杀死，存活细胞即为稳定表达目标基因的克隆。
4. 应用场景
基因表达研究：用于外源基因（如目的蛋白、受体、信号分子）的稳定表达，避免瞬时转染的表达时效性问题。
细胞示踪与成像：利用 RFP 荧光标记，可通过荧光显微镜、流式细胞术（FACS）或活体成像技术追踪细胞。
病毒包装系统：作为包装细胞株生产携带目的基因的病毒颗粒（如慢病毒），用于感染其他难转染的细胞类型。
药物筛选与毒性分析：结合荧光信号变化，快速评估药物对细胞形态、增殖或凋亡的影响。
5. 培养与维护要点
培养基：通常使用 DMEM 或 MEM 培养基，添加 10% 胎牛血清（FBS）、青霉素 - 链霉素双抗，以及维持浓度的嘌呤霉素（通常为 0.5–2 µg/mL，需预实验优化）。
培养条件：37℃、5%CO2 ，贴壁培养时需定期传代，避免细胞过度汇合导致状态下降。
荧光监测：定期通过荧光显微镜观察 RFP 表达强度，确保标记基因未丢失。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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