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KU812-RFP-Puro稳转株
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详细内容
KU812-RFP-Puro稳转株
英文名称 | KU812-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1655 |
中文名称 | RFP 标记的 KU812 稳转株 |
Lot number | KU812-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 骨髓母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 20% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景知识:
KU812 细胞系:KU812 细胞是人外周血嗜碱性白血病细胞系,具有骨髓细胞样形态,呈悬浮生长,常被用于白血病相关的研究,如细胞分化、信号转导以及药物敏感性等方面的研究。
RFP:RFP 是红色荧光蛋白的缩写,可作为报告基因。在细胞生物学研究中,RFP 可以方便地通过荧光显微镜或流式细胞术等手段进行观察和分析,用于追踪细胞的位置、监测基因的表达情况以及研究细胞的生物学行为等。
Puro:Puro 指嘌呤霉素,是一种抗生素。在基因工程中,常用于筛选含有相应抗性基因的细胞。带有 Puro 抗性基因的载体转染或感染细胞后,只有成功导入并表达该抗性基因的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而实现对阳性细胞的筛选。
构建方法:通常采用慢病毒感染法来构建 KU812 - RFP - Puro 稳转株。将包含 RFP 基因和 Puro 抗性基因的慢病毒载体包装成慢病毒颗粒,然后用这些慢病毒颗粒去感染 KU812 细胞。慢病毒进入细胞后,其基因组会整合到 KU812 细胞的染色体中,使细胞获得稳定表达 RFP 和对嘌呤霉素具有抗性的特性。之后,使用含有嘌呤霉素的培养基对感染后的细胞进行筛选,只有成功整合了慢病毒载体的细胞才能存活并继续增殖,最终形成稳定表达 RFP 的 KU812 - RFP - Puro 稳转株。
应用领域:
细胞示踪:由于 RFP 能够发出红色荧光,可在体外或体内对 KU812 细胞进行示踪。例如,将稳转株移植到动物模型中,可以通过荧光成像技术观察细胞在动物体内的分布、迁移和增殖情况,有助于研究白血病细胞的生物学行为和发病机制。
药物研发:利用该稳转株可以进行药物筛选和药效评价。例如,研究人员可以将不同的药物作用于稳转株细胞,通过观察细胞的生长、凋亡以及 RFP 表达情况等指标,来评估药物对 KU812 细胞的作用效果,为白血病等相关疾病的药物研发提供重要的实验依据。
基因表达调控研究:RFP 作为报告基因,可以直观地反映出细胞内基因表达的情况。通过对 KU812 - RFP - Puro 稳转株进行不同的处理或转染其他基因,可以研究基因表达的调控机制以及基因之间的相互作用。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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