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NCI-H596-GFP-Puro稳转株
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详细内容
NCI-H596-GFP-Puro稳转株
英文名称 | NCI-H596-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1690 |
中文名称 | GFP 标记的 NCI-H596 稳转株 |
Lot number | NCI-H596-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

1. 基本信息
细胞来源:NCI-H596 是一种人肺鳞癌细胞系,源自一位 61 岁男性患者的肺部肿瘤,属于非小细胞肺癌(NSCLC)的一种亚型。该细胞系具有鳞癌的典型特征,如表达细胞角蛋白(CK)等标志物。
稳转株构建:通过基因工程技术将 **GFP(绿色荧光蛋白)和Puro(嘌呤霉素抗性基因)** 导入 NCI-H596 细胞,形成稳定表达 GFP 且对嘌呤霉素具有抗性的细胞株。
GFP 标记:便于通过荧光显微镜直接观察细胞形态、定位及示踪,广泛应用于细胞生物学研究(如细胞迁移、侵袭、药物递送效率等)。
Puro 抗性:用于筛选成功转染的细胞(未整合抗性基因的细胞会被嘌呤霉素杀死),确保稳转株的稳定性和纯度。
2. 主要应用场景
肿瘤研究:
追踪肺癌细胞在体内外的行为(如侵袭、转移),通过 GFP 荧光信号直观观察肿瘤细胞与微环境的相互作用。
研究肺癌细胞的增殖、凋亡机制,或评估药物对肿瘤细胞的抑制效果(如通过荧光强度变化反映细胞活性)。
基因功能研究:
将 GFP 与目标基因融合表达,研究目标蛋白的亚细胞定位、动态分布及表达水平。
结合嘌呤霉素筛选,构建稳定过表达或敲低特定基因的细胞模型,用于长期功能验证(如信号通路研究)。
药物开发与筛选:
利用 GFP 的荧光特性,高通量筛选靶向肺癌细胞的药物或纳米载体,评估药物递送效率和细胞摄取能力。
通过稳转株的稳定性,长期监测药物对肿瘤细胞的毒性或耐药性发展。
3. 培养与维护要点
培养基:通常使用 RPMI 1640 培养基,添加 10% 胎牛血清(FBS)、1% 双抗(青霉素 / 链霉素),并根据需要加入嘌呤霉素(Puro)进行筛选维持(浓度需预实验优化,通常为 0.5–2 µg/mL)。
培养条件:37℃、5% CO₂培养箱,贴壁生长,需定期传代(汇合度达 80%–90% 时消化传代)。
荧光检测:使用荧光显微镜(激发光波长 488 nm,发射光波长 509 nm)观察 GFP 表达,确保稳转株的荧光强度稳定(若荧光减弱可能提示细胞状态异常或质粒丢失)。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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