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Capan-2-GFP-Puro稳转株
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详细内容
Capan-2-GFP-Puro稳转株
英文名称 | Capan-2-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1740 |
中文名称 | GFP 标记的 Capan-2 稳转株 |
Lot number | Capan-2-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | McCoy's 5a + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

构建原理
通过基因工程技术将GFP 表达载体(携带 Puro 抗性基因)导入 Capan-2 细胞,利用嘌呤霉素筛选出稳定整合外源基因的细胞克隆,最终获得Capan-2-GFP-Puro 稳转株。该细胞株可稳定表达 GFP,便于实时追踪细胞行为(如迁移、侵袭)或用于细胞示踪实验。
应用场景
1. 细胞成像与示踪
荧光显微镜观察:GFP 荧光信号可直接显示细胞形态、分布及动态变化(如肿瘤细胞在体内的转移路径)。
活体成像研究:将稳转株移植到动物模型中,通过活体荧光成像技术监测肿瘤生长或药物响应。
2. 药物筛选与毒性评估
利用 GFP 荧光强度或细胞存活率(结合 MTT、CCK-8 等实验),快速评估抗肿瘤药物对 Capan-2 细胞的抑制效果。
通过嘌呤霉素抗性筛选,维持细胞中外源基因的稳定表达,确保实验结果的一致性。
3. 基因功能研究
作为载体工具,用于过表达或敲低特定基因(如与胰腺癌耐药相关的基因),结合 GFP 标记追踪基因表达对细胞表型的影响。
培养与维护要点
1. 培养基与添加剂
基础培养基:通常使用 RPMI 1640 或 DMEM 培养基,添加 10% 胎牛血清(FBS)、1% 双抗(青霉素 + 链霉素)。
筛选压力维持:在培养过程中需持续添加嘌呤霉素(浓度需预实验优化,通常为 0.5~2 µg/mL),以防止未整合载体的细胞过度生长。
2. 细胞传代与观察
当细胞密度达 80%~90% 时传代,消化液使用 0.25% 胰酶 - EDTA。
定期通过荧光显微镜检查 GFP 表达效率,确保稳转株特性稳定。
3. 冻存与复苏
冻存液:建议使用 90% FBS+10% DMSO,或专用细胞冻存液。
复苏要点:快速解冻后,用含嘌呤霉素的新鲜培养基接种,次日换液以去除 DMSO。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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