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HIC-GFP-Puro稳转株
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详细内容
HIC-GFP-Puro稳转株
英文名称 | HIC-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1793 |
中文名称 | GFP 标记的 HIC 稳转株 |
Lot number | HIC-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

构建方法:通常借助慢病毒介导、转座子介导、CRISPR 敲入及质粒筛选等方法将包含 HIC 基因、GFP 基因以及 Puro 抗性基因的表达载体导入宿主细胞。以慢病毒介导为例,先构建含目的基因的慢病毒表达载体,再进行慢病毒包装,产生具有感染能力的慢病毒颗粒,然后用其感染靶细胞,使病毒将遗传物质整合到宿主细胞基因组中,通过嘌呤霉素筛选出稳定表达外源基因的细胞克隆,经单克隆培养、扩增与鉴定等步骤获得 HIC - GFP - Puro 稳转株。
应用领域:在生物学研究中,可用于研究 HIC 基因的功能,通过观察 GFP 的荧光来追踪 HIC 基因在细胞内的表达和定位情况,也可用于筛选与 HIC 基因相互作用的分子或药物。在药物研发领域,可作为细胞模型,用于筛选针对 HIC 基因或其相关通路的药物,评估药物的疗效和毒性等。在细胞治疗研究中,可将其作为种子细胞,经过进一步的修饰和处理后,用于细胞治疗的实验研究和临床试验。
优势:能在较长时间内稳定表达 HIC 基因和 GFP,便于长期观察和研究。相比瞬时转染,稳转株细胞群体中每个细胞都含有稳定整合的外源基因,基因表达更均一,实验结果重复性好。通过 Puro 抗性筛选,可获得高纯度的稳定表达细胞株,减少未转染细胞的干扰。
局限性:构建过程复杂且耗时较长,一般需要数周甚至数月时间。并非所有细胞都能高效地构建成稳转株,某些细胞类型可能对转染或筛选过程敏感,导致构建成功率低。长期培养过程中,稳转株可能会出现基因沉默或表达水平变化的情况,影响实验结果的稳定性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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