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ACT-1-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
ACT-1-GFP-Puro稳转株
英文名称 | ACT-1-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1829 |
中文名称 | GFP 标记的 ACT-1 稳转株 |
Lot number | ACT-1-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、基本组成与原理
核心组件
ACT-1：通常指细胞内源性表达的肌动蛋白（Actin）基因或其启动子。肌动蛋白是细胞骨架的重要组成部分，在多数细胞中广泛表达，因此常用其启动子驱动目标基因的稳定表达。
GFP：绿色荧光蛋白（Green Fluorescent Protein），作为报告基因，用于实时观察和追踪细胞内蛋白定位、细胞形态变化或细胞增殖情况。GFP 在蓝光激发下会发出绿色荧光，便于通过荧光显微镜或流式细胞术检测。
Puro：嘌呤霉素（Puromycin）抗性基因，用于稳转株的筛选。嘌呤霉素是一种抗生素，可抑制原核和真核细胞的蛋白质合成，只有成功整合了 Puro 抗性基因的细胞才能在含嘌呤霉素的培养基中存活。
构建原理
通过病毒转染（如慢病毒、逆转录病毒）或质粒转染技术，将包含 ACT-1 启动子、GFP 基因和 Puro 抗性基因的表达载体导入目标细胞（如哺乳动物细胞）。
利用嘌呤霉素筛选压力，淘汰未成功整合载体的细胞，最终获得稳定表达 GFP 且对嘌呤霉素具有抗性的单克隆细胞株（稳转株）。
二、主要应用场景
细胞追踪与成像
GFP 的荧光特性使其可直接用于观察细胞在体外培养或体内（如动物模型）的迁移、分化或存活情况。例如：
在肿瘤研究中，标记肿瘤细胞以追踪其转移路径；
在干细胞研究中，监测干细胞的分化过程。
基因表达分析
通过 ACT-1 启动子驱动 GFP 表达，可反映肌动蛋白基因的转录活性或细胞内源性启动子的功能。例如：
研究细胞骨架相关基因的调控机制；
评估药物对细胞基础代谢或基因表达的影响。
稳转株筛选与验证
Puro 抗性基因作为筛选标记，确保目标基因（如 GFP）在细胞中的稳定整合和遗传。常用于构建稳定表达其他功能基因（如目的蛋白、shRNA）的细胞模型。
细胞功能研究
结合荧光激活细胞分选（FACS）技术，可分离高表达 GFP 的细胞亚群，用于单细胞分析或功能富集研究。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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