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NCI-H157-GFP-Puro稳转株
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详细内容
NCI-H157-GFP-Puro稳转株
英文名称 | NCI-H157-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1803 |
中文名称 | GFP 标记的 NCI-H157 稳转株 |
Lot number | NCI-H157-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 多角细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1 mM丙酮酸钠+ 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞背景:NCI - H157 是人类非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系,常用于癌症研究,以探讨肿瘤发生、化疗耐药性以及肺癌进展中的分子通路等,在研究缺氧诱导因子 - 1α(HIF - 1α)在非小细胞肺癌中的作用方面特别有用。
构建原理:通常是将包含绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素抗性(Puro)基因的外源 DNA,通过慢病毒等载体转染到 NCI - H157 细胞中。外源 DNA 整合到细胞染色体后,利用嘌呤霉素抗性基因进行筛选,只有成功整合了外源 DNA 并表达嘌呤霉素抗性蛋白的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而得到稳定表达 GFP 的 NCI - H157 - GFP - Puro 稳转株。
标记与筛选特性:
GFP 标记:GFP 能在荧光显微镜下发出绿色荧光,可用于直观地观察细胞内的基因表达、蛋白质定位、细胞追踪等。例如,研究人员可以通过观察 GFP 的荧光信号,了解目的基因在细胞中的表达位置和动态变化。
嘌呤霉素抗性筛选:嘌呤霉素是一种氨基糖苷类抗生素,能抑制蛋白质合成。在细胞培养中加入嘌呤霉素,只有携带 Puro 抗性基因的稳转株细胞才能生长,未成功转染或未稳定整合外源基因的细胞会被杀死,从而实现对稳转株细胞的筛选和维持。
应用领域:
癌症研究:借助 GFP 的标记,可研究 NCI - H157 细胞在肿瘤形成、发展、侵袭和转移等过程中的行为变化,例如将稳转株细胞接种到动物模型中,通过观察 GFP 荧光来追踪肿瘤细胞在体内的生长和扩散情况。
药物研发:用于筛选针对 NCI - H157 细胞的抗癌药物,通过观察药物处理后稳转株细胞的生长、凋亡以及 GFP 表达变化等,评估药物的疗效和作用机制。
基因功能研究:作为工具细胞,用于研究特定基因在 NCI - H157 细胞中的功能。例如,将目的基因与 GFP 融合表达,通过观察 GFP 的荧光变化来推断目的基因的表达调控和功能特性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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