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HS68-GFP-Puro稳转株
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详细内容
HS68-GFP-Puro稳转株
英文名称 | Hs68-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1817 |
中文名称 | GFP 标记的 Hs68 稳转株 |
Lot number | Hs68-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

基本信息
细胞类型:HS68 细胞是源自人类正常皮肤成纤维细胞的永生化细胞系,常用于细胞生物学、衰老研究及基因功能分析等领域。
标记与筛选:
GFP(绿色荧光蛋白):通过基因工程手段将 GFP 基因稳定整合到 HS68 细胞基因组中,使细胞表达 GFP,可通过荧光显微镜直接观察或流式细胞术(FACS)进行检测和分选。
Puro(嘌呤霉素):稳转株构建过程中使用嘌呤霉素抗性基因作为筛选标记,便于通过嘌呤霉素药物筛选获得稳定表达目标基因的细胞克隆。
构建流程
载体构建:
将 GFP 基因与嘌呤霉素抗性基因(如 PuroR)插入到合适的载体(如慢病毒载体、逆转录病毒载体或质粒载体)中,形成重组表达载体。
细胞转染 / 感染:
通过病毒感染(慢病毒 / 逆转录病毒)或化学转染(如脂质体转染)将重组载体导入 HS68 细胞。
病毒感染优势:适用于难转染的细胞类型,整合效率高,基因表达稳定。
药物筛选:
转染 / 感染后的细胞在含有嘌呤霉素的培养基中培养,未成功整合抗性基因的细胞被淘汰,存活细胞为稳定整合载体的稳转株。
单克隆筛选与鉴定:
通过有限稀释法或流式细胞术分选单克隆细胞,扩大培养后通过荧光检测、Western blot 等方法验证 GFP 的稳定表达。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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