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详细内容
BCPAP-GFP-Puro稳转株
英文名称 | BCPAP-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1809 |
中文名称 | GFP 标记的 BCPAP 稳转株 |
Lot number | BCPAP-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

BCPAP-GFP-Puro 稳转株概述
BCPAP 细胞是一种来源于甲状腺乳头状癌(PTC)的人源细胞系,具有上皮细胞形态,常用于甲状腺癌相关的肿瘤生物学、信号通路、药物筛选等研究。
** 稳转株(Stable Cell Line)** 是指通过基因工程手段将外源基因(如质粒、病毒载体携带的目的基因)稳定整合到细胞基因组中,使目的基因能够在细胞中长期表达的细胞株。稳转株的优势在于基因表达稳定,可用于长期实验(如体内成瘤实验、慢性药物处理研究等)。
BCPAP-GFP-Puro 稳转株的关键特征
1. GFP 标记
** 绿色荧光蛋白(GFP)** 作为报告基因,通过荧光显微镜或流式细胞术可直接观察和筛选成功转染的细胞,便于实时追踪细胞状态、定位蛋白表达或进行细胞分选。
应用场景:
细胞成像:观察细胞形态、迁移或侵袭能力。
蛋白定位研究:通过 GFP 融合蛋白定位目标蛋白在细胞内的分布(如细胞质、细胞核或细胞膜)。
细胞示踪:在动物模型中标记肿瘤细胞,监测肿瘤生长或转移。
2. 嘌呤霉素(Puro)抗性筛选
** 嘌呤霉素(Puromycin, Puro)** 是一种氨基糖苷类抗生素,可通过抑制核糖体功能杀死未成功整合外源基因的细胞。
稳转株构建流程:
将携带 GFP 基因和Puro 抗性基因的载体(如慢病毒载体)转染或感染 BCPAP 细胞。
用嘌呤霉素处理细胞,未整合载体的细胞死亡,存活细胞即为稳定表达 GFP 且具有 Puro 抗性的稳转株。
3. 稳定表达特性
外源基因整合至细胞基因组后,可随细胞分裂持续表达,避免瞬时转染中基因表达短暂的问题。
适用于需要长期观察或需要高表达水平的实验(如基因功能研究、药物耐药性分析)。
应用领域
肿瘤生物学研究
分析 BCPAP 细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭机制,GFP 标记可直观反映细胞行为变化。
构建荷瘤小鼠模型时,通过荧光成像监测肿瘤生长和转移(如肺转移、淋巴结转移)。
基因功能研究
将 GFP 与目的基因(如癌基因、抑癌基因)融合表达,研究基因在细胞内的定位及功能。
通过 RNA 干扰(shRNA)构建稳转株,实现目的基因的稳定敲低,用于表型验证。
药物筛选与耐药性研究
利用 GFP 荧光强度评估药物对细胞活性的影响(如药物处理后细胞数量或荧光强度下降提示细胞毒性)。
筛选具有特定耐药性的细胞亚群(如长期药物处理后存活的稳转株细胞)。
细胞信号通路研究
结合 GFP 标记的信号分子(如 GFP-ERK、GFP-AKT),观察通路蛋白的激活或定位变化。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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