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KHM-5M-GFP-Puro稳转株
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详细内容
KHM-5M-GFP-Puro稳转株
英文名称 | KHM-5M-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1839 |
中文名称 | GFP 标记的 KHM-5M 稳转株 |
Lot number | KHM-5M-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

KHM-5M 细胞系:KHM-5M 细胞系来源于一位患有未分化甲状腺癌并伴有中性粒细胞增多症和恶性胸膜炎的患者,是重要的疾病模型细胞系。该细胞系能显著产生中性粒细胞趋化因子,如人白细胞介素 8(IL-8)和粒细胞 - 巨噬细胞集落刺激因子(GM - CSF),在研究肿瘤细胞与免疫微环境相互作用,特别是中性粒细胞募集和功能方面具有重要价值。
稳转株构建:通过将包含绿色荧光蛋白(GFP)基因和嘌呤霉素抗性(Puro)基因的外源 DNA 克隆到载体上,然后利用慢病毒等方法将重组载体转染至 KHM - 5M 细胞中,使外源基因整合到细胞的染色体中。之后,使用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了外源基因并稳定表达的细胞才能在筛选中存活下来,从而得到 KHM - 5M - GFP - Puro 稳转株。
应用:
可视化研究:GFP 作为报告基因,在荧光显微镜下可发出绿色荧光,能够方便地对细胞进行实时观察和追踪,比如用于研究细胞的生长、迁移、分化等过程,以及在动物模型中观察细胞在体内的分布和动态变化。
药物筛选和基因功能研究:Puro 抗性基因使稳转株对嘌呤霉素具有抗性,可用于在细胞培养中进行药物筛选,维持稳转株的稳定传代。同时,利用该稳转株可以在 KHM - 5M 细胞背景下持续过表达或干扰特定基因,进而深入研究相关基因的功能,以及基因对细胞生物学行为、肿瘤发生发展机制等方面的影响。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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