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Ocut-2C-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
Ocut-2C-GFP-Puro稳转株
英文名称 | Ocut-2C-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1845 |
中文名称 | GFP 标记的 Ocut-2C 稳转株 |
Lot number | Ocut-2C-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 梭形细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、基本概念
细胞背景
Ocut-2C：可能是某种特定细胞系（如肿瘤细胞、正常体细胞等），需结合具体研究领域确认来源（例如，“Ocut” 可能与口腔癌细胞相关，但需根据文献或实验背景进一步验证）。
GFP：绿色荧光蛋白（Green Fluorescent Protein），作为报告基因，用于可视化追踪细胞或目标蛋白的表达位置及动态变化。
Puro：嘌呤霉素（Puromycin），是一种抗生素，用于稳转株筛选 —— 通过质粒载体将抗嘌呤霉素的基因（如puro 抗性基因）导入细胞，未成功整合目的基因的细胞会被嘌呤霉素杀死，从而筛选出稳定表达目标基因的细胞株。
核心特征
稳定表达：目的基因（如 GFP）通过质粒或病毒载体整合到细胞基因组中，可在传代过程中稳定遗传。
荧光标记：GFP 表达后使细胞在荧光显微镜下发出绿色荧光，便于实时观察细胞形态、迁移、分化等过程。
抗性筛选：利用嘌呤霉素抗性基因实现阳性克隆的筛选，确保稳转株的纯度。
二、构建原理与流程
载体设计
构建含以下元件的重组载体：
GFP 编码序列：与目标基因（如需研究的功能基因）融合或独立表达，用于荧光标记。
Puro 抗性基因：如puroR基因，使细胞获得嘌呤霉素抗性。
启动子（如 CMV 启动子）：驱动 GFP 和抗性基因的转录。
细胞转染
通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒、逆转录病毒）将重组载体导入 Ocut-2C 细胞。
抗性筛选
转染后使用嘌呤霉素处理细胞，未成功整合载体的细胞死亡，存活细胞形成稳定表达 GFP 和抗性基因的克隆。
单克隆筛选与鉴定
通过有限稀释法或流式细胞术筛选单克隆细胞，利用荧光显微镜、Western blot 等技术验证 GFP 的稳定表达。
三、应用场景
细胞成像与追踪
利用 GFP 荧光信号实时观察细胞在体外或体内（如动物模型）的分布、增殖、凋亡等过程。
示例：研究肿瘤细胞（如 Ocut-2C）的迁移能力，或药物对细胞形态的影响。
基因功能研究
将 GFP 与目标基因（如癌基因、抑癌基因）融合表达，通过荧光定位分析蛋白亚细胞分布，或通过荧光强度变化反映基因表达水平。
药物筛选与毒性检测
基于稳转株的荧光信号强度或细胞存活率，高通量筛选影响目标基因表达或细胞功能的药物。
嘌呤霉素抗性可作为筛选标记，确保实验中细胞株的稳定性。
细胞示踪与体内研究
移植 GFP 标记的稳转株到动物体内，通过活体成像技术监测肿瘤生长、转移或免疫细胞相互作用。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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