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HDF-a-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
HDF-a-RFP-Puro稳转株
英文名称 | HDF-a-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1850 |
中文名称 | RFP 标记的 HDF-a 稳转株 |
Lot number | HDF-a-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
定义与背景：稳转株即稳定表达的细胞株，是基于某一细胞系构建的能持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。HDF-a 是一种细胞系，可能是某种人类皮肤成纤维细胞系。RFP 是红色荧光蛋白（Red Fluorescent Protein）的缩写，Puro 是嘌呤霉素（Puromycin）的缩写。通常是通过慢病毒感染等方法，将携带 RFP 基因和嘌呤霉素抗性基因的载体导入 HDF-a 细胞中，经过嘌呤霉素筛选后，得到稳定表达 RFP 的 HDF-a 细胞株，即 HDF-a-RFP-Puro 稳转株。
构建方法：
病毒载体构建：将 RFP 基因和嘌呤霉素抗性基因克隆到合适的慢病毒载体中，构建成重组慢病毒载体。
慢病毒包装：将重组慢病毒载体转染到包装细胞中，如 293T 细胞，产生具有感染能力的慢病毒颗粒。
细胞感染：用慢病毒颗粒感染 HDF-a 细胞，使病毒载体进入细胞并将其基因整合到细胞基因组中。
药物筛选：感染后的细胞用含有嘌呤霉素的培养基进行筛选，只有成功整合了病毒载体并表达嘌呤霉素抗性基因的细胞才能存活，从而得到稳定表达 RFP 的 HDF-a-RFP-Puro 稳转株。
应用：
细胞示踪：RFP 可以作为一种荧光标记，方便在体外或体内对 HDF-a 细胞进行追踪和观察。例如，在研究细胞的迁移、分化等过程中，可以通过观察 RFP 的荧光来了解 HDF-a 细胞的行为。
基因表达研究：如果 RFP 基因与其他目的基因在同一载体上，且处于同一转录单元，那么可以通过观察 RFP 的表达情况来间接了解目的基因的表达水平。因为 RFP 的荧光强度可以通过荧光显微镜或流式细胞仪等设备进行定量分析，从而为基因表达的研究提供一种直观、便捷的方法。
药物筛选和细胞模型建立：HDF-a-RFP-Puro 稳转株可以作为一种细胞模型，用于筛选对该细胞系有作用的药物或研究某些疾病的发病机制。例如，在研究皮肤疾病的药物治疗时，可以用该细胞株来评估药物对细胞的影响，以及观察药物是否能够调节某些基因的表达。
培养与维护：培养 HDF-a-RFP-Puro 稳转株时，需要使用合适的培养基，一般是在基础培养基中添加 10% 的胎牛血清（FBS）和 1% 的双抗（青霉素 - 链霉素），同时还需要添加适量的嘌呤霉素（通常浓度在 1-10µg/ml）来维持对稳转株的筛选压力，以确保细胞持续表达 RFP。培养条件为 37℃、5% CO2 的培养箱。在细胞传代过程中，要注意保持细胞的密度和生长状态，避免细胞过度生长或密度过低导致细胞状态变差。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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