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详细内容
HMC3-GFP-Puro稳转株
英文名称 | HMC3-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1855 |
中文名称 | GFP 标记的 HMC3 稳转株 |
Lot number | HMC3-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 巨噬细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | MEM + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景知识:
HMC3 细胞:HMC3 细胞是人小胶质细胞,是通过 SV40 永生化人胎儿大脑原代小胶质细胞培养物建立的。它保留了原代小胶质细胞的特性,是可以无限期生长的同质细胞群,是小胶质细胞功能生化分析的便捷模型,且能支持后续转染,可用于研究小胶质细胞中各种转染基因的表达调控。
稳转株:稳转株即稳定表达的细胞株,是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。构建稳转株的原理是将外源 DNA/shRNA 克隆到带有某种抗性基因的载体上,重组载体被转染至宿主细胞并整合到其染色体中,能随细胞分裂稳定传递下去,再用载体中所含抗性基因进行筛选。
HMC3 - GFP - Puro 稳转株的特点:
GFP 标记:GFP 即绿色荧光蛋白,在该稳转株中,GFP 基因被导入 HMC3 细胞。GFP 能在特定波长的光激发下发出绿色荧光,可作为报告基因,用于直观地观察和追踪细胞内的特定事件,如基因表达、细胞定位、细胞迁移等。通过荧光显微镜或其他荧光检测设备,能方便地检测到表达 GFP 的 HMC3 细胞,有助于对细胞进行定性和定量分析。
Puro 抗性:Puro 是嘌呤霉素的缩写,该稳转株含有嘌呤霉素抗性基因。这意味着在细胞培养过程中,可以使用嘌呤霉素来筛选和维持稳定转染的细胞。只有成功整合了含有 Puro 抗性基因载体的 HMC3 细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活和生长,而未转染或未稳定整合载体的细胞则会被嘌呤霉素杀死,从而实现对稳转株细胞的筛选和富集。
应用领域:
细胞生物学研究:借助 GFP 的荧光特性,可实时观察 HMC3 细胞在生长、分化、凋亡等过程中的动态变化,以及研究细胞内各种信号通路的激活和调控机制。例如,观察在不同刺激条件下,细胞内特定蛋白质的定位和转运情况,或者研究细胞骨架的动态变化与细胞迁移的关系。
神经科学研究:HMC3 细胞作为小胶质细胞模型,在神经科学领域有重要应用。HMC3 - GFP - Puro 稳转株可用于研究小胶质细胞在神经发育、神经退行性疾病(如阿尔茨海默病、帕金森病等)、脑损伤修复等过程中的作用和机制。比如,通过观察 GFP 标记的小胶质细胞在神经元共培养体系中的行为,了解小胶质细胞对神经元的支持、保护或损伤作用。
药物研发:可作为药物筛选的细胞模型,用于评估药物对小胶质细胞的作用效果。例如,筛选能够调节小胶质细胞炎症反应、增殖、迁移等功能的药物,为治疗神经炎症相关疾病的药物研发提供实验依据。同时,利用 GFP 的荧光信号变化,可以快速、直观地判断药物对细胞的影响,如药物是否能够抑制小胶质细胞的活化,或者是否能够诱导细胞发生特定的变化。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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