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HCE-T-GFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
HCE-T-GFP-Puro稳转株
英文名称 | HCE-T-GFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1921 |
中文名称 | GFP 标记的 HCE-T 稳转株 |
Lot number | HCE-T-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H/F-12 + 5µg/ml Insulin + 10ng/ml hEGF + 15% FBS |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
HCE-T-GFP-Puro 稳转株概述
HCE-T 细胞是一种人角膜上皮细胞系，常用于眼科疾病、角膜损伤修复等研究。**GFP（绿色荧光蛋白）** 是常用的报告基因，可通过荧光显微镜直观观察细胞表达情况。**Puro（嘌呤霉素）** 是一种抗生素，用于稳转株筛选，含有 Puro 抗性基因的细胞可在含嘌呤霉素的培养基中存活。
核心特性：
稳转株定义：通过基因工程技术将目标基因（如 GFP）稳定整合到 HCE-T 细胞基因组中，使细胞持续表达 GFP 且可通过传代稳定遗传。
筛选标记：利用 Puro 抗性基因筛选成功转染的细胞，未整合抗性基因的细胞会被嘌呤霉素杀死，确保稳转株纯度。
荧光示踪：GFP 表达使细胞在蓝光激发下发出绿色荧光，便于实时追踪细胞形态、迁移、分化等生物学过程，或用于细胞分选（如 FACS）。
构建流程（示意图）：
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1. 载体构建：将GFP基因与Puro抗性基因插入质粒载体（如慢病毒载体）。
2. 细胞转染：通过病毒感染（慢病毒/逆转录病毒）或化学转染法将载体导入HCE-T细胞。
3. 筛选与扩增：加入嘌呤霉素培养基培养，存活细胞为成功整合目的基因的单克隆细胞。
4. 鉴定验证：通过荧光显微镜观察GFP表达、Western blot检测蛋白水平、PCR验证基因整合。
应用场景：
细胞生物学研究：
观察角膜上皮细胞的增殖、凋亡、细胞骨架动态变化。
研究细胞间相互作用或药物对细胞形态的影响（如荧光共定位分析）。
基因功能研究：
作为报告系统，分析目的基因（与 GFP 融合表达）的亚细胞定位或表达调控。
体内示踪实验：
将稳转株移植到动物模型（如小鼠角膜），通过荧光成像追踪细胞在体内的存活、迁移及分化。
药物筛选平台：
构建携带疾病相关基因的 GFP 稳转株，用于高通量筛选影响基因表达或细胞表型的药物。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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