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HCE-T-RFP-Puro稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
HCE-T-RFP-Puro稳转株
英文名称 | HCE-T-RFP-Puro polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H1922 |
中文名称 | RFP 标记的 HCE-T 稳转株 |
Lot number | HCE-T-10A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H/F-12 + 5µg/ml Insulin + 10ng/ml hEGF + 15% FBS |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
背景知识：HCE-T 细胞是源自人角膜上皮细胞，通过转染含有 SV40 复制起点和劳斯肉瘤病毒长末端重复序列的质粒 RSV-T 而永生化的细胞系。它保留了原代角膜上皮细胞的许多功能和表型特征，如典型的上皮形态、形成贴壁单层的能力以及细胞角蛋白和其他重要上皮标志物的表达，是体外眼科学研究的重要资源，广泛用于研究角膜上皮生物学的各个方面，如细胞黏附、迁移、分化以及对外部刺激的反应等。
构建方法：通常是利用慢病毒载体构建技术。将包含红色荧光蛋白（RFP）基因和嘌呤霉素抗性（Puro）基因的表达盒，通过慢病毒载体导入 HCE-T 细胞中。慢病毒几乎可以感染所有种类的细胞，并且在感染后容易整合到受感染细胞的基因组，使 RFP 基因和 Puro 基因能够在 HCE-T 细胞中稳定表达，然后利用嘌呤霉素进行筛选，得到稳定转染的 HCE-T-RFP-Puro 稳转株。
筛选标记：Puro 即嘌呤霉素，是一种抗生素。在构建稳转株的过程中，只有成功导入了含有 Puro 抗性基因载体的细胞，才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活，从而实现对稳转细胞的筛选。RFP 作为荧光标记蛋白，在细胞内表达后可发出红色荧光。科研人员可以通过荧光显微镜等设备观察到细胞是否表达 RFP，以此来判断目的基因是否成功导入并在细胞中表达，还可以用于对细胞进行定位和示踪等研究。
应用领域：在眼科药物研发中，可用于研究药物对角膜上皮细胞的作用机制、药物的吸收和转运等过程，还能通过观察 RFP 的表达情况来评估药物对细胞内特定信号通路的影响。在角膜疾病机制研究方面，借助该稳转株可以深入探讨角膜上皮细胞在疾病发生、发展过程中的变化，如在干眼病、角膜炎等疾病研究中，通过观察细胞形态、功能以及相关基因表达的变化，揭示疾病的发病机制。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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