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HEp-2-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
HEp-2-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | HEp-2-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2325 |
中文名称 | ffluc 标记的 HEp-2 稳转株 |
Lot number | HEp-2-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 15% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
HEp-2-Puro+ffluc 稳转株概述
HEp-2 细胞是一种源自人喉癌的上皮细胞系，常用于病毒学、肿瘤学等研究。** 稳转株（稳定转染细胞株）** 是指通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中，使其能长期表达特定蛋白或标记物的细胞群体。
关键要素解析：
Puro（嘌呤霉素）
作用：作为筛选标记，用于筛选成功转染的细胞。含有 Puro 抗性基因的细胞可在含嘌呤霉素的培养基中存活，未转染细胞则被淘汰。
应用场景：确保外源基因在细胞中的稳定存在，常用于构建稳转株的筛选阶段。
ffluc（萤火虫荧光素酶）
功能：作为报告基因，其表达产物可催化荧光素发光，通过检测荧光强度定量分析基因表达水平、细胞增殖、体内成像（如肿瘤移植模型）等。
优势：灵敏度高、检测便捷，适用于活体动物成像或体外细胞追踪研究。
HEp-2-Puro+ffluc 稳转株的构建流程
载体构建
将 ffluc 基因与 Puro 抗性基因插入同一质粒载体，形成重组表达载体（如 pLVX-ffluc-Puro）。
细胞转染
通过病毒感染（如慢病毒、逆转录病毒）或化学转染法将重组载体导入 HEp-2 细胞。
筛选与扩增
加入嘌呤霉素培养基培养，未成功转染的细胞死亡，存活细胞形成单克隆并扩增，获得稳定表达 ffluc 的细胞株。
鉴定与验证
分子水平：通过 PCR 检测 ffluc 基因整合，Western blot 验证蛋白表达。
功能水平：利用荧光素酶检测系统（如 Luciferase Assay）验证酶活性，确认荧光信号强度。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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