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SK-BR-3-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
SK-BR-3-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | SK-BR-3-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2362 |
中文名称 | ffluc 标记的 SK-BR-3 稳转株 |
Lot number | SK-BR-3-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | McCOY's 5A + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞来源:SK - BR - 3 细胞是 1970 年从一位 43 岁白人女性乳腺癌患者的胸腔积液中分离得到的。该细胞具有上皮细胞样形态,呈贴壁生长,亚显微结构特征包括微丝和桥粒、肝糖原颗粒、大溶酶体、成束的细胞质纤丝,并且过表达 HER2/c - erb - 2 基因产物。
构建过程:通常是通过慢病毒转染的方式,将携带目的基因(如 ffluc,即萤火虫荧光素酶基因)以及抗性基因(如 Puro,嘌呤霉素抗性基因)的重组载体导入 SK - BR - 3 细胞中。重组载体整合到细胞染色体后,能随细胞分裂稳定传递。之后利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了重组载体并表达出抗性蛋白的细胞才能存活,最终得到稳定表达萤火虫荧光素酶的 SK - BR - 3 - Puro + ffluc 稳转株。
应用领域:由于该细胞株稳定表达萤火虫荧光素酶,可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照。还可用于活体动物成像实验,将其接种到动物体内,通过检测荧光信号,能够对肿瘤细胞的生长、转移等过程进行实时监测和研究。
培养条件:一般使用 90% 5A 培养基 + 10% FBS(胎牛血清) + PS(青霉素 - 链霉素双抗)进行培养,培养环境为气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳,温度 37℃。在培养过程中,若担心抗性随着传代时间降低,可定期用 0.5ug/ml 浓度的嘌呤霉素维持。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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