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MDA-MB-468-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
MDA-MB-468-Puro+ffluc稳转株
产品名称 | MDA-MB-468-Puro+ffluc 稳转株 |
产品货号 | XY-H2370 |
中文名称 | ffluc 标记的 MDA-MB-468 稳转株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | L-15 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:100%空气;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

相关背景:MDA - MB - 468 细胞是 1977 年从一位患有转移性乳腺癌的 51 岁黑人女性的胸腔积液中分离得到的,为上皮细胞样,属于肿瘤细胞,其 p53 基因 273 位密码子存在 G→A 突变,每个细胞上存在 1×10⁶个 EGF 受体。
构建过程:通常是将含有目的基因(可能是与 ffluc 相关的基因)以及嘌呤霉素抗性基因(Puro)的载体,通过慢病毒感染或转染等方法导入 MDA - MB - 468 细胞。然后利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了外源载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并稳定表达目的蛋白,最终得到 MDA - MB - 468 - Puro + ffluc 稳转株。
抗性筛选原理:嘌呤霉素是一种氨基糖苷类抗生素,它能够抑制细胞蛋白质的合成。在细胞培养中,未导入含有嘌呤霉素抗性基因载体的细胞会被嘌呤霉素杀死,而成功导入并整合了该抗性基因的细胞则能够抵抗嘌呤霉素的作用,继续生长和增殖,从而实现稳定转染细胞的筛选。
ffluc 的作用:ffluc 通常指萤火虫荧光素酶(firefly luciferase),它可以催化荧光素在 ATP、Mg²⁺和氧气存在的条件下发生氧化反应,产生生物荧光。在细胞实验中,ffluc 常被用作报告基因,用于监测基因的表达、细胞的代谢活动、信号通路的激活等,还可以用于体内成像研究,例如将稳转株接种到动物模型中,通过检测荧光来追踪肿瘤细胞的生长、转移和对治疗的反应等。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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