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T47D-GFP-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
T47D-GFP-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | T47D-GFP-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2366 |
中文名称 | ffluc 和 GFP 双标的 T47D 稳转株 |
Lot number | T47D-24D1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞背景:T47D 细胞是乳腺导管癌细胞,具有良好的增殖和分化潜能,在医学和生物学研究中常用于乳腺相关疾病,特别是乳腺癌的研究,如研究肿瘤细胞的生长、侵袭、转移机制以及药物筛选等。
相关基因与特性
GFP(绿色荧光蛋白):该基因能使细胞发出绿色荧光,便于在荧光显微镜下对细胞进行观察和追踪,可用于监测细胞的位置、形态变化以及细胞内的一些生理过程。例如,在研究细胞迁移时,通过观察 GFP 的荧光信号就能了解 T47D 细胞的移动轨迹和分布情况。
Puro(嘌呤霉素抗性基因):赋予细胞对嘌呤霉素的抗性。在细胞培养过程中,加入嘌呤霉素可以筛选出成功导入了含有 Puro 基因载体的细胞,只有那些整合了外源 DNA 并表达 Puro 的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而保证得到的细胞株是稳定转染的细胞。
ffluc(萤火虫荧光素酶基因):编码的荧光素酶可以催化荧光素底物发生反应产生生物荧光。常被用作报告基因,通过检测荧光素酶的活性来反映细胞内某些基因的表达水平或信号通路的活性。比如,将 ffluc 基因与特定的启动子连接,当该启动子被激活时,ffluc 基因就会表达,通过检测荧光强度就能知道启动子的活性变化,进而了解相关基因的调控机制。
构建过程:通常是利用慢病毒感染等方法,将含有 GFP、Puro 和 ffluc 基因的载体导入 T47D 细胞。慢病毒具有高效整合、目标细胞广泛等特点,能将外源基因整合到 T47D 细胞的染色体上,使细胞长期稳定表达这些基因。然后,使用嘌呤霉素进行筛选,得到稳定转染并表达目的基因的细胞株,再通过单克隆筛选等方法获得单细胞长出的阳性单克隆,最终得到 T47D - GFP - Puro + ffluc 稳转株。
应用领域
肿瘤学研究:可用于研究乳腺癌细胞的体内外生长、转移和侵袭机制。例如,将稳转株接种到动物模型中,通过检测 GFP 和 ffluc 的信号,观察肿瘤细胞在动物体内的生长位置、大小变化以及转移情况,深入了解乳腺癌的发展过程。
药物研发:作为药物筛选的工具细胞,在体外筛选对乳腺癌细胞有抑制作用的药物。通过观察药物处理后稳转株中 ffluc 的活性变化以及 GFP 标记的细胞数量和形态变化,评估药物对肿瘤细胞的杀伤效果和作用机制。
基因功能研究:借助 GFP 和 ffluc 的报告功能,研究与乳腺癌相关的基因表达调控和信号通路。比如,研究某些转录因子对特定基因启动子的激活作用,将该转录因子基因与 T47D - GFP - Puro + ffluc 稳转株共转染,观察 ffluc 荧光强度的变化,就能判断转录因子对目的基因的调控作用。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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