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MDA-MB-175 VII-GFP-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
MDA-MB-175 VII-GFP-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | MDA-MB-175 VII-GFP-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2379 |
中文名称 | ffluc 和 GFP 双标的 MDA-MB-175 VII 稳转株 |
Lot number | MDA-MB-175 VII-24D1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | L-15 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:100%空气;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞来源:MDA - MB - 175 VII 细胞源自一位患有乳腺导管癌的女性的胸腔积液,属于人乳腺导管癌细胞系,具有上皮细胞样形态,呈松散贴壁生长特性。
构建原理:通过将包含绿色荧光蛋白(GFP)基因、嘌呤霉素抗性(Puro)基因和萤火虫荧光素酶(ffluc)基因的外源 DNA 克隆到带有相应抗性基因的载体上,然后采用脂质体转染或病毒转染等方法,使重组载体进入 MDA - MB - 175 VII 细胞,并整合到其染色体中。利用嘌呤霉素进行筛选,获得能稳定表达 GFP 和 ffluc 的细胞株,即 MDA - MB - 175 VII - GFP - Puro + ffluc 稳转株。
各基因作用:
GFP:作为报告基因,方便在荧光显微镜下直接观察细胞内的基因表达情况,可用于监测细胞的转染效率、定位表达以及细胞追踪等。
Puro:嘌呤霉素抗性基因,用于在细胞培养过程中进行筛选。只有成功整合了外源 DNA 并表达出嘌呤霉素抗性蛋白的细胞,才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而筛选出稳定转染的细胞。
ffluc:萤火虫荧光素酶基因,其表达的荧光素酶可与底物发生反应产生荧光。通过检测荧光强度,能定量分析基因的表达水平,常用于基因表达调控、药物筛选、细胞信号通路研究等领域。
应用领域:
肿瘤研究:由于其源自乳腺导管癌细胞,可用于研究乳腺癌的发生、发展机制,以及肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移等生物学行为。例如,通过观察 GFP 的表达情况,追踪肿瘤细胞在动物模型体内的转移过程;利用 ffluc 进行定量分析,研究不同条件下肿瘤细胞的生长速率和对药物的敏感性。
基因功能研究:可以通过调控该稳转株中特定基因的表达,观察其对细胞生物学功能的影响,进而明确基因在乳腺导管癌细胞中的作用机制。
药物研发:用于筛选针对乳腺癌细胞的潜在药物靶点,评估药物对肿瘤细胞的抑制效果。通过 ffluc 的荧光强度变化,快速判断药物是否对细胞生长、代谢产生影响,为药物研发提供重要的实验依据。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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