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786-O-GFP-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
786-O-GFP-Puro+ffluc稳转株
产品名称 | 786-O-GFP-Puro+ffluc 稳转株 |
产品货号 | XY-H2387 |
中文名称 | GFP 和 ffluc 双标的 786-O 稳转株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞来源:786 - O 细胞是人肾透明细胞腺癌细胞,由于 VHL 的表达缺失而导致细胞内 HIF2α 大量累积,进而诱导多种 HIF2α 下游靶基因的表达,是研究 HIF2α 激动剂的细胞系。
相关标记物:
GFP(绿色荧光蛋白):是一种能在蓝光或紫外光激发下发出绿色荧光的蛋白质。在细胞中表达 GFP,可用于实时观察细胞的位置、形态以及细胞内的各种生理过程,比如可以通过荧光显微镜直接观察到稳转株细胞在培养过程中的分布、迁移情况等,也可用于在动物体内追踪肿瘤细胞的生长和转移。
Puro(嘌呤霉素)抗性基因:使细胞具有对嘌呤霉素的抗性。在细胞培养过程中,加入嘌呤霉素可以筛选出成功转染并稳定表达外源基因的细胞,只有那些整合了含有 Puro 抗性基因的载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并生长,这样就保证了得到的细胞株是稳定转染的细胞。
ffluc(萤火虫荧光素酶):能够催化荧光素底物发生氧化反应而发出生物荧光。通过检测荧光素酶的活性,可以反映出细胞内相关基因的表达水平或者细胞的代谢状态等,常用于体内成像实验,如将稳转株接种到动物模型中,通过给动物注射荧光素底物,利用成像设备可以观察到肿瘤细胞在动物体内的生长、分布以及对药物治疗的反应等。
构建过程:一般是通过慢病毒介导的方法将包含 GFP、Puro 抗性基因和 ffluc 的表达载体导入 786 - O 细胞中。首先构建含有这些基因的慢病毒表达载体,然后将其与慢病毒包装质粒共转染到 293T 等包装细胞中,产生具有感染能力的慢病毒颗粒。收集慢病毒颗粒并感染 786 - O 细胞,之后利用嘌呤霉素进行筛选,得到稳定转染的细胞克隆,再通过单克隆挑选和功能学评价等步骤,最终获得 786 - O - GFP - Puro + ffluc 稳转株。
应用领域:在癌症研究中,可用于观察肾癌细胞在体外培养条件下的生长、增殖、迁移和侵袭等特性,以及在动物模型中研究肿瘤的发生、发展和转移机制。在药物研发方面,可作为筛选模型,用于筛选针对肾癌细胞的潜在治疗药物,通过观察药物对稳转株细胞中相关基因表达、细胞活力、荧光素酶活性等指标的影响,来评估药物的疗效和作用机制。还可用于研究基因功能,通过调控稳转株中某些基因的表达,观察其对细胞生物学行为的影响,进而深入了解肾癌细胞的生物学特性和相关信号通路。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:786-O-GFP-Puro+ffluc稳转株,GFP,和,ffluc,双标的,786-O,稳转株,786-O,稳转株













