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293FT-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
293FT-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | 293FT-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2400 |
中文名称 | ffluc 标记的 293FT 稳转株 |
Lot number | 293FT-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、基础概念解析
1. 293FT 细胞背景
来源：293FT 细胞是 293 细胞（人胚肾细胞）的衍生株，通过稳定转染 SV40 大 T 抗原基因构建，具有高效的病毒包装能力，常用于慢病毒、逆转录病毒载体的生产。
特性：贴壁生长，倍增时间短，适合大规模培养；支持外源基因的高效表达，尤其适用于需要病毒载体的基因传递实验。
2. 关键元件说明
Puro：嘌呤霉素（Puromycin）抗性基因，用于稳转株筛选。携带该基因的细胞在嘌呤霉素存在的培养基中可存活，未成功转染的细胞则被淘汰。
ffluc：萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase）基因，属于报告基因。其表达产物可通过荧光素底物发光，用于检测细胞存活、增殖、体内成像或基因表达水平等。
二、稳转株的构建与筛选流程
1. 载体构建
将ffluc 基因与Puro 抗性基因克隆至合适的载体（如慢病毒载体、质粒载体）中，通常需包含启动子（如 CMV）以驱动基因表达。
2. 转染与病毒包装（以慢病毒为例）
转染 293FT 细胞：将重组载体与包装质粒（如 psPAX2、pMD2.G）共转染至 293FT 细胞，生产携带目的基因的慢病毒颗粒。
病毒收集：培养 48⁻⁷2 小时后，收集上清液并过滤，获得高滴度病毒液。
3. 感染靶细胞
将病毒液感染目标细胞（如肿瘤细胞、免疫细胞等），通过病毒介导的基因整合，使 ffluc 和 Puro 基因稳定插入宿主基因组。
4. 嘌呤霉素筛选
感染后的细胞在含嘌呤霉素的培养基中培养，未成功整合抗性基因的细胞死亡，存活细胞形成稳转株，即稳定表达 ffluc 且具有嘌呤霉素抗性的细胞株。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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