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HMEC-1-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
HMEC-1-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | HMEC-1-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2408 |
中文名称 | ffluc 标记的 HMEC-1 稳转株 |
Lot number | HMEC-1-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | ECM专用培养基 |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

构建原理:通常是利用慢病毒感染等方法,将含有目的基因(如 ffluc,即荧光素酶基因)以及抗性基因(如 Puro,嘌呤霉素抗性基因)的载体导入 HMEC-1 细胞中。载体中的外源 DNA 会整合到 HMEC-1 细胞的染色体上,使细胞能够稳定表达荧光素酶,同时赋予细胞对嘌呤霉素的抗性,便于后续通过嘌呤霉素筛选出成功导入载体并稳定表达目的基因的细胞,从而得到 HMEC-1-Puro+ffluc 稳转株。
应用领域:
药物研发:可用于研究药物对微血管内皮细胞的作用机制。例如,通过观察在药物处理后,稳转株中荧光素酶的表达变化,来反映药物对细胞内某些信号通路或基因表达的影响,为筛选治疗心血管疾病等相关药物提供细胞模型。
肿瘤研究:由于肿瘤的生长和转移依赖于新生血管的形成,HMEC-1-Puro+ffluc 稳转株可用于研究肿瘤细胞与微血管内皮细胞之间的相互作用。例如,将肿瘤细胞与稳转株共培养,通过检测荧光素酶的活性变化,了解肿瘤细胞对微血管内皮细胞功能的影响,以及血管生成相关因子的作用机制。
基因功能研究:借助荧光素酶的报告基因特性,研究特定基因在微血管内皮细胞中的功能。比如,通过对稳转株进行基因沉默或过表达实验,观察荧光素酶表达水平的变化,进而推断该基因对微血管内皮细胞的生长、迁移、凋亡等生物学行为的调控作用。
培养条件:一般来说,HMEC-1 细胞的培养基为 ECM(内皮细胞培养基)添加 10% FBS(胎牛血清)、10ng/ml EGF(表皮生长因子)、1µg/ml 、10mM HEPES 以及 1% 双抗(青霉素 - 链霉素)。在培养 HMEC-1-Puro+ffluc 稳转株时,可能还需要在培养基中添加适量的嘌呤霉素,以维持对稳转株的筛选压力,确保细胞持续稳定地表达目的基因。具体的培养条件可能因实验室的不同而有所差异,需要根据实际情况进行优化。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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