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MKN-45-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
MKN-45-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | MKN-45-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2403 |
中文名称 | ffluc 标记的 MKN-45 稳转株 |
Lot number | MKN-45-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁/悬浮生长,混合 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景信息:MKN - 45 细胞是由 Hojo H 建立,源于日本一位 62 岁低分化胃腺癌女性患者的肝转移灶,具有上皮细胞样形态,呈圆形,贴壁和少量悬浮生长,培养时通常使用 RPMI1640 培养基,添加 10% 胎牛血清和 1% 双抗。在此基础上构建的 MKN - 45 - Puro + ffluc 稳转株,是通过将含有萤火虫荧光素酶(ffluc)基因和嘌呤霉素抗性基因(Puro)的载体导入 MKN - 45 细胞中,并经过筛选得到的能够稳定表达萤火虫荧光素酶的细胞株。
特性与应用:
荧光素酶表达:该稳转株稳定表达萤火虫荧光素酶,这使得它在生物学研究中具有多种应用。例如,可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照,为相关实验提供标准参考。同时,利用荧光素酶与底物反应产生荧光的特性,可通过活体动物成像实验,对肿瘤细胞在动物体内的生长、转移等过程进行实时监测和追踪,为肿瘤生物学研究和药物研发提供重要的实验模型。
药物筛选标记:嘌呤霉素抗性基因的存在,使得在细胞培养过程中可以使用嘌呤霉素进行筛选,只有成功导入载体并稳定表达抗性基因的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而保证了培养的细胞是稳定转染的细胞株。
培养要点:MKN - 45 - LUC 细胞(与 MKN - 45 - Puro + ffluc 稳转株类似,均为含荧光素酶的 MKN - 45 细胞系)puro 药筛浓度为 1.0µg/ml,培养过程中若担心抗性随传代时间降低,可定期用 0.5µg/ml 浓度 puro 维持。此外,该细胞生长过程中容易成团,消化时间需要控制好,不能吹打过猛,否则容易产生细胞碎片,导致皿底变脏。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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