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MKN-28-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
MKN-28-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | MKN-28-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2404 |
中文名称 | ffluc 标记的 MKN-28 稳转株 |
Lot number | MKN-28-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

MKN - 28 细胞:MKN - 28 细胞是一种人胃癌细胞系,来源于人胃管腺癌,具有上皮细胞样形态,呈贴壁生长特性。其完全培养基通常由 RPMI - 1640 培养基、10% 胎牛血清和 1% 双抗组成,培养条件为气相 95% 空气、5% 二氧化碳,温度 37 摄氏度。
稳转株构建:通过慢病毒感染的方式,将携带特定基因的外源 DNA 整合到 MKN - 28 细胞的基因组中。一般是把外源 DNA 克隆到含有抗性基因(如嘌呤霉素抗性基因 Puro)的载体上,载体转染到 MKN - 28 细胞后,利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了外源 DNA 并表达抗性蛋白的细胞才能存活,从而得到稳定表达目的基因的细胞株。
Puro 的作用:Puro 即嘌呤霉素,在稳转株构建过程中作为筛选标记。只有成功转入含有 Puro 抗性基因载体的 MKN - 28 细胞,才能在含有嘌呤霉素的培养基中生长,未成功转入的细胞则会被嘌呤霉素杀死,从而筛选出稳定表达外源基因的细胞。
ffluc 的作用:ffluc 通常指萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)。在细胞实验中,它常作为报告基因。当细胞内有 ffluc 表达时,在加入其底物荧光素后,会发生化学反应产生荧光。通过检测荧光的强度,可以反映 ffluc 基因的表达水平,进而了解与之相关的目的基因的表达、调控等情况,或用于监测细胞的活动、代谢等过程。例如在一些研究中,可以通过观察 ffluc 的荧光变化来研究 MKN - 28 细胞在不同条件下的基因表达变化,或者用于追踪 MKN - 28 细胞在动物体内的生长、转移等情况。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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