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HUVEC-GFP-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
HUVEC-GFP-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | HUVEC-GFP-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2410 |
中文名称 | ffluc 和 GFP 双标的 HUVEC 稳转株 |
Lot number | HUVEC-24D1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | ECM专用培养基 |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
HUVEC-GFP-Puro+ffluc 稳转株概述
HUVEC 即人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells），是血管内皮细胞研究中常用的细胞模型，广泛应用于血管生成、炎症反应、肿瘤微环境等领域。
稳转株的关键特性
GFP 标记
绿色荧光蛋白（GFP） 作为报告基因，可通过荧光显微镜直接观察细胞的存活状态、分布及转染效率，便于实时追踪细胞在体外或体内的行为（如移植后的定植情况）。
应用场景：细胞示踪、细胞分选（如流式细胞术）、共定位分析等。
嘌呤霉素抗性（Puro+）
嘌呤霉素（Puromycin） 是一种抗生素，用于筛选成功整合外源基因的稳转细胞株。带有 Puro 抗性基因 的细胞可在含嘌呤霉素的培养基中存活，未成功转染的细胞则被淘汰，确保稳转株的纯度。
萤火虫荧光素酶（ffluc）标记
ffluc 是萤火虫荧光素酶基因，其表达产物可催化荧光素氧化并产生生物发光。通过活体成像技术（如小动物成像系统），可定量检测细胞在动物体内的增殖、转移或药物响应，适用于肿瘤模型、药效评估等 体内研究。
构建流程与技术要点
载体设计
构建包含 GFP、Puro 抗性基因、ffluc 的慢病毒或质粒载体，通常通过多顺反子系统（如 IRES 序列）实现多基因共表达。
细胞转染
采用慢病毒感染（适用于难转染细胞）或脂质体转染等方法，将载体导入 HUVEC 细胞。
抗性筛选
转染后使用嘌呤霉素进行压力筛选，存活细胞经有限稀释法或单细胞克隆获得纯合稳转株。
鉴定与验证
荧光检测：通过荧光显微镜或流式细胞术确认 GFP 阳性率（通常需＞95%）。
** Luciferase 活性检测 **：利用荧光素酶报告基因检测试剂盒，验证 ffluc 的表达水平及酶活性。
稳定性评估：传代培养 20 代以上，检测 GFP 和 ffluc 表达是否维持稳定。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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