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HEC-1-B-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
HEC-1-B-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | HEC-1-B-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2428 |
中文名称 | ffluc 标记的 HEC-1-B 稳转株 |
Lot number | HEC-1-B-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | EMEM + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

1. 基础信息
细胞背景
HEC-1-B 是一种人子宫内膜癌细胞系,源自子宫内膜腺癌,常用于子宫内膜癌的基础研究(如肿瘤发生机制、药物筛选等)。
稳转株特性
“Puro+ffluc” 表示该细胞株通过基因工程手段稳定转入了两种标记基因:
Puro:嘌呤霉素抗性基因(Puromycin resistance gene),用于稳转株的筛选和维持(通过嘌呤霉素药物筛选存活细胞)。
ffluc:萤火虫荧光素酶基因(Firefly luciferase gene),可表达荧光素酶蛋白,通过荧光成像或生物发光技术(如活体成像)追踪细胞在体内外的行为(如增殖、迁移、肿瘤形成等)。
2. 构建流程
稳转株的构建通常包括以下步骤:
载体构建:将 Puro 和 ffluc 基因克隆到同一质粒载体中,通常带有启动子(如 CMV)驱动基因表达。
细胞转染:通过脂质体转染、电穿孔等方法将载体导入 HEC-1-B 细胞。
药物筛选:使用嘌呤霉素处理细胞,未成功整合载体的细胞死亡,存活细胞即为稳定表达 Puro 和 ffluc 的单克隆或多克隆细胞群。
验证鉴定:通过荧光显微镜观察荧光表达、Western blot 检测蛋白水平、生物发光实验验证酶活性,确保基因稳定表达。
3. 应用场景
体内肿瘤研究
将稳转株接种到动物模型(如裸鼠)中,通过活体成像技术实时监测肿瘤生长、转移及药物治疗效果(荧光素酶催化底物产生生物发光,可定量检测肿瘤负荷)。
体外细胞功能研究
荧光标记用于细胞示踪(如细胞迁移、侵袭实验)、细胞分选(流式细胞术)或共定位分析(与其他荧光蛋白联用)。
药物筛选:利用嘌呤霉素抗性维持稳转株,同时通过荧光信号强度评估基因表达水平或药物对细胞的影响。
基因功能研究
作为工具细胞株,用于研究目标基因与 ffluc 的共表达效应,或通过敲低 / 过表达其他基因结合荧光标记分析表型变化。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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