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Y79-GFP-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
Y79-GFP-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | Y79-GFP-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2421 |
中文名称 | ffluc 和 GFP 双标的 Y79 稳转株 |
Lot number | Y79-31A8P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T12.5细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 圆形 |
生长特性 | 成簇,悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 20% FBS |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

Y79 细胞:是一种人视网膜母细胞瘤细胞。1971 年 1 月,由 T.W. Reid 及其同事通过对摘除后立即获得的右眼原发肿瘤的外植体培养分离得到。该细胞悬浮聚团生长,细胞传代时需要冲散细胞为单细胞后传代,复苏生长较慢,需要 1 周左右时间。
GFP(绿色荧光蛋白):源于深海海葵,由 238 个氨基酸组成,核心是由丝氨酸、酪氨酸和天冬氨酸组成的 “荧光花环”,能在紫外光下自发荧光,通过共轭共振将紫外光转化为 509nm 的绿色荧光。将 GFP 与目标基因融合,可给蛋白质打上发光标签,用于实时监控基因表达、定位蛋白质、追踪活体中的细胞或分子等,在生命科学研究中应用广泛。
Puro(嘌呤霉素):是一种抗生素,常用于筛选稳定转染的细胞。在构建稳转株时,携带目的基因的载体通常也会携带 Puro 抗性基因。当细胞被转染后,在含有 Puro 的培养基中培养,只有成功转染并整合了载体的细胞才能表达 Puro 抗性蛋白,从而存活下来,未转染或未稳定整合载体的细胞则会被杀死。
ffluc(萤火虫荧光素酶):是一种生物发光酶,在 ATP、镁离子、氧气和荧光素存在的条件下,能催化荧光素氧化发光。常被用作报告基因,用于检测基因的表达水平、细胞的活性、药物的作用效果等。与 GFP 类似,ffluc 基因也可与目的基因融合表达,通过检测荧光素酶的活性来反映目的基因的表达情况。
稳转株:即稳定表达的细胞株,是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。构建稳转株的原理是将外源 DNA 克隆到带有某种抗性基因的载体上,重组载体被转染至宿主细胞并整合到其染色体中,能随细胞分裂稳定传递下去,再用载体中所含抗性基因进行筛选。
Y79-GFP-Puro+ffluc 稳转株就是以 Y79 人视网膜母细胞瘤细胞为基础,通过基因工程技术,将 GFP 基因、ffluc 基因以及 Puro 抗性基因导入细胞中,并使其稳定整合到细胞染色体上,能够持续表达 GFP 和 ffluc 蛋白,同时对嘌呤霉素具有抗性的细胞株。可用于在细胞和活体水平上对 Y79 细胞进行荧光标记和追踪,以及研究相关基因的功能、药物对细胞的作用等。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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