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ARPE-19-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
ARPE-19-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | ARPE-19-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2423 |
中文名称 | ffluc 标记的 ARPE-19 稳转株 |
Lot number | ARPE-19-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM/F12 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、基本概念
1. ARPE-19 细胞株
来源：ARPE-19 是一种永生化的人视网膜色素上皮（RPE）细胞株，源自正常人视网膜色素上皮组织，通过病毒转化（如 SV40 大 T 抗原）获得无限增殖能力。
应用：常用于眼科疾病研究（如年龄相关性黄斑变性、视网膜色素变性）、细胞凋亡、氧化应激、炎症反应及药物毒性测试等领域。
2. 稳转株（Stable Cell Line）
定义：通过基因工程技术将外源基因（如报告基因、目的基因）稳定整合到细胞基因组中，使细胞能够持续表达目标基因的细胞群体。
特点：外源基因可随细胞分裂稳定遗传，适用于长期研究（如蛋白表达、信号通路分析、体内成像等）。
二、ARPE-19-Puro+ffluc 稳转株的构建
1. 关键元件
Puro（嘌呤霉素抗性基因）：用于稳转株的筛选。转染后，只有成功整合外源基因并表达 Puro 抗性的细胞能在含嘌呤霉素的培养基中存活。
ffluc（萤火虫荧光素酶基因）：作为报告基因，其表达产物（荧光素酶）可催化荧光素氧化发光，通过生物发光成像（BLI）技术定量检测细胞数量、分布及基因表达水平。
2. 构建流程
载体构建：将 ffluc 基因和 Puro 抗性基因插入到质粒载体（如慢病毒载体、逆转录病毒载体）中，形成重组表达载体。
细胞转染：通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染（如慢病毒）将重组载体导入 ARPE-19 细胞。
筛选与扩增：使用嘌呤霉素筛选存活细胞，经有限稀释法或单克隆挑选获得纯合稳转株，扩大培养后验证 ffluc 表达稳定性。
三、应用场景
1. 体内成像研究
原理：通过腹腔或静脉注射荧光素底物，ffluc 标记的细胞在体内发光，利用小动物活体成像系统（如 IVIS）实时监测细胞在动物模型（如小鼠）中的迁移、定植及增殖情况。
示例：研究视网膜色素上皮细胞在眼底疾病模型中的分布，或评估药物对细胞存活的影响。
2. 体外功能分析
基因表达验证：通过荧光素酶活性检测（如 Luciferase Assay）定量分析 ffluc 表达，验证稳转株的稳定性。
药物筛选：结合荧光素酶活性变化，评估药物对 ARPE-19 细胞增殖、凋亡或信号通路的影响（如抗氧化药物对 RPE 细胞氧化损伤的保护作用）。
3. 机制研究
信号通路追踪：可与其他报告基因（如 GFP、RFP）联用，或通过 ffluc 标记特定通路蛋白，研究细胞内信号传导机制。
共转染实验：与其他基因（如 siRNA、shRNA）共转染，分析基因互作或沉默效应。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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