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SK-N-MC-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
SK-N-MC-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | SK-N-MC-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2447 |
中文名称 | ffluc 标记的 SK-N-MC 稳转株 |
Lot number | SK-N-MC-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

SK - N - MC 细胞系:SK - N - MC 细胞系源自一位 14 岁白人女性患者的转移性眼眶上区域的神经上皮瘤。在体外培养中,该细胞呈现上皮样的贴壁生长特性,具有特定的 STR 基因型和同工酶表达,在免疫缺陷小鼠中能够形成肿瘤,常被用于药物敏感性研究、药物筛选和活性测定、神经保护研究等。
Puro(嘌呤霉素)抗性:构建稳转株时,通常会将带有某种抗性基因的载体导入细胞,这里的 Puro 抗性基因来源于载体。嘌呤霉素是一种氨基糖苷类抗生素,它能够抑制细胞蛋白质的合成,对细胞具有毒性。而导入了含 Puro 抗性基因载体的细胞,能够在含有嘌呤霉素的培养基中存活,未导入的细胞则会死亡,利用这一特性可筛选出成功转染的细胞。
ffluc(萤火虫荧光素酶):ffluc 基因常被用作报告基因。萤火虫荧光素酶可以催化荧光素在 ATP、镁离子和氧气存在的条件下发生氧化反应,产生生物荧光。将 ffluc 基因与目的基因连接,或者将其导入细胞中作为独立的报告基因,通过检测荧光强度,就可以反映目的基因的表达情况或者细胞内某些生物学过程的变化。例如在一些实验中,可通过观察 ffluc 的荧光来判断特定基因是否被激活、药物是否对细胞产生了作用等。
稳转株的构建:一般是通过将含有 Puro 抗性基因和 ffluc 基因的载体,利用转染质粒或病毒侵染的方法导入 SK - N - MC 细胞。然后使用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了外源基因的细胞才能在筛选中存活下来,并持续稳定地表达 ffluc,从而得到 SK - N - MC - Puro + ffluc 稳转株。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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