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详细内容
DAOY-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | DAOY-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2442 |
中文名称 | ffluc 标记的 DAOY 稳转株 |
Lot number | DAOY-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 多边形细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

相关背景:
DAOY 细胞:1985 年建系于 F p・雅各布森皇家澳大利亚西部珀斯医院,活检材料取自一个 4 岁男孩的后颅窝肿瘤,为结缔组织增生性小脑髓母细胞,形态为上皮样,贴壁生长,可用于科研。培养条件为温度 37℃,气体环境是 5%CO2 +95% 空气。
稳转株构建:通常是将目的基因序列或抑制目的基因的 shRNA 序列装载至重组载体中,再通过慢病毒系统或转座子系统将目的序列整合至宿主细胞的染色体中,实现目的基因持续、稳定的调控。在构建 DAOY-Puro+ffluc 稳转株时,可能是利用慢病毒等载体将携带 ffluc 基因以及与 Puro 抗性相关的基因片段导入 DAOY 细胞,经筛选后得到能稳定表达 ffluc 且具有嘌呤霉素抗性的细胞株。
命名含义:
“DAOY”:代表细胞系的来源,即人髓母细胞瘤细胞系 DAOY。
“Puro”:指嘌呤霉素(Puromycin),表明该稳转株具有对嘌呤霉素的抗性。在构建稳转株过程中,使用嘌呤霉素作为筛选标记,只有成功整合了外源基因(包含 Puro 抗性基因)的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并稳定传代。
“ffluc”:通常指萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)基因。该基因编码的荧光素酶可以催化荧光素底物发生氧化反应,产生生物发光,便于通过荧光检测等手段对细胞进行观察和分析,例如用于监测细胞的活性、增殖、在动物体内的分布等情况。
应用领域:
肿瘤研究:由于 DAOY 细胞来源于髓母细胞瘤,构建的稳转株可用于研究肿瘤细胞的生物学特性,如细胞增殖、侵袭、转移等过程中相关基因的功能。ffluc 基因的表达可帮助追踪肿瘤细胞在体内外的动态变化,为肿瘤发生发展机制的研究提供模型。
药物研发:可用于筛选针对髓母细胞瘤的潜在治疗药物。通过观察药物对 DAOY-Puro+ffluc 稳转株细胞生长、增殖、凋亡等的影响,以及 ffluc 表达变化反映出的细胞代谢等方面的改变,评估药物的疗效和作用机制。还能用于研究药物在体内的药代动力学和药效学,例如将稳转株接种到动物模型中,通过检测荧光信号来观察药物对肿瘤细胞的抑制效果随时间和剂量的变化。
基因功能研究:借助 ffluc 的报告基因特性,可研究特定基因在 DAOY 细胞中的表达调控机制。例如,将感兴趣的基因与 ffluc 基因构建成融合蛋白表达载体,转染到 DAOY-Puro+ffluc 稳转株中,通过检测荧光强度变化来分析该基因在不同条件下的表达水平和活性变化,进而了解其在细胞生理过程中的功能。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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