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BT-20-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
BT-20-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | BT-20-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2451 |
中文名称 | ffluc 标记的 BT-20 稳转株 |
Lot number | BT-20-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | EMEM + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
基本概念
BT-20 细胞系：BT-20 细胞是由 E・Y・Lasfargues 和 L・Ozzello 于 1958 年建系，源自一位 74 岁白人女性的乳腺癌组织。该细胞呈上皮细胞样，贴壁生长，表达 WNT3 和 WNT78，TNF-α 可抑制其生长，雌激素受体阴性，但表达 5'- 外显子缺失的雌激素 mRNA。
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Puro：即嘌呤霉素（puromycin），是一种常用的抗生素，在稳转株构建中作为筛选标记。带有 Puro 抗性基因的载体转染细胞后，只有成功整合了载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活。
ffluc：通常指萤火虫荧光素酶（firefly luciferase）基因，将其导入细胞后，细胞会表达萤火虫荧光素酶。该酶可催化荧光素底物发生氧化反应，产生生物荧光，便于通过荧光检测来监测细胞的活动、基因表达情况等。
构建方法
载体选择与构建：选择合适的载体，如慢病毒载体，将含有 ffluc 基因以及 Puro 抗性基因的 DNA 片段克隆到载体中，构建成重组载体。
细胞培养：将 BT-20 细胞在合适的培养基中培养，使其处于对数生长期，以保证细胞状态良好，利于后续转染。
转染或感染：采用脂质体转染法、电穿孔法或慢病毒感染法等，将重组载体导入 BT-20 细胞中。如使用慢病毒感染时，需先确定最佳的感染复数（MOI），以达到高效感染且对细胞损伤较小的目的。
筛选稳转株：在转染或感染后的细胞中加入含有嘌呤霉素的培养基进行筛选。未成功整合重组载体的细胞会因缺乏 Puro 抗性而死亡，只有成功整合并稳定表达 Puro 抗性基因和 ffluc 基因的细胞才能存活并形成稳转株。经过一段时间的筛选和培养，可得到稳定表达 ffluc 的 BT-20-Puro+ffluc 稳转株细胞克隆。
应用领域
癌症研究：可用于乳腺癌相关的基础研究，如研究肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移等生物学行为，以及探索肿瘤发生发展的分子机制等。通过监测 ffluc 的荧光信号变化，可实时观察 BT-20 细胞在体内外的生长、转移情况。
药物研发：作为药物筛选的细胞模型，用于评估抗癌药物对 BT-20 细胞的作用效果。例如，观察药物对稳转株细胞增殖、凋亡、细胞周期等方面的影响，还可以通过荧光信号变化快速筛选出对 BT-20 细胞具有抑制作用的药物或化合物。
基因功能研究：借助 ffluc 基因的报告功能，研究特定基因在 BT-20 细胞中的表达调控机制，以及该基因对细胞生物学功能的影响。也可通过 RNA 干扰等技术沉默或过表达某些基因，结合 ffluc 的荧光检测，分析这些基因对 BT-20 细胞行为的调控作用。
研究意义
提供稳定模型：为乳腺癌的研究提供了一种稳定的细胞模型，避免了瞬时转染或其他不稳定表达系统中基因表达短暂、表达量不均一等问题，有利于长期、稳定地研究基因功能和细胞生物学行为。
便于定量分析：ffluc 的荧光信号强度与细胞内基因表达水平或细胞数量等呈一定的相关性，可通过荧光定量分析对相关指标进行精确测量，为研究提供更准确的数据支持。
体内外研究结合：既可以在体外进行细胞水平的实验研究，又可以将稳转株细胞接种到动物模型中，开展体内实验，实现体内外研究的有机结合，更地了解乳腺癌细胞的生物学特性和疾病发生发展过程。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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