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NCI-H1373-ffluc2-GFP-Puro稳转细胞株
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详细内容
NCI-H1373-ffluc2-GFP-Puro稳转细胞株
产品名称 | NCI-H1373-ffluc2-GFP-Puro 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-H2620 |
中文名称 | ffluc2 和 GFP 双标的 NCI-H1373 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)稳转细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |

细胞系背景:NCI - H1373 细胞是从一位 56 岁患有肺腺癌的黑人男性的原发性肺肿瘤中建立的。它通常在含有 10% 胎牛血清的 RPMI - 1640 培养基中培养。
构建原理:一般是通过慢病毒感染等方法,将携带 ffluc2(荧光素酶基因)、GFP(绿色荧光蛋白基因)以及 Puro(嘌呤霉素抗性基因)的外源 DNA 克隆到载体上,然后将载体转染至 NCI - H1373 细胞中,使这些基因整合到细胞的染色体中。利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了外源基因并稳定表达的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而得到 NCI - H1373 - ffluc2 - GFP - Puro 稳转细胞株。
应用:
荧光成像与示踪:GFP 作为一种报告基因,在细胞内表达后会发出绿色荧光,可通过荧光显微镜等设备对细胞进行实时观察和追踪,了解细胞在体内外的分布、迁移和增殖等情况。例如,在研究细胞的发育、分化以及肿瘤细胞的转移等过程中,可利用 GFP 的荧光特性对 NCI - H1373 细胞进行标记和跟踪。
生物发光检测:ffluc2 编码的荧光素酶能够催化荧光素底物发生反应产生生物发光。通过检测生物发光的强度,可以定量分析细胞内的基因表达水平、细胞活性以及细胞数量等。在药物研发中,可以利用 ffluc2 报告基因来评估药物对细胞内特定信号通路的影响,或者筛选能够调节特定基因表达的药物。
细胞筛选与鉴定:Puro 抗性基因的存在使得只有成功转染并稳定表达外源基因的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中生长。因此,在细胞培养过程中,使用嘌呤霉素进行筛选,可以快速富集和鉴定出稳定表达 ffluc2 和 GFP 的 NCI - H1373 细胞,排除未转染或不稳定表达的细胞,从而获得纯净的稳转细胞株用于后续实验。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:NCI-H1373-ffluc2-GFP-Puro稳转细胞株,ffluc2,和,GFP,双标的,NCI-H1373,稳转细胞株,NCI-H1373,稳转细胞株















