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Toledo-GFP+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
Toledo-GFP+ffluc稳转株
英文名称 | Toledo-GFP+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2622 |
中文名称 | ffluc 和 GFP 双标的 Toledo 稳转株 |
Lot number | Toledo-31B2-24D4-10A1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
基本背景
细胞来源：Toledo 细胞是 1990 年从患有弥漫性大细胞淋巴瘤（非霍奇金 B 细胞）的成年白人女性患者的外周血中分离的 B 淋巴细胞系。
基因修饰：通过基因工程技术，将绿色荧光蛋白（GFP）基因和荧光素酶（ffluc）基因导入 Toledo 细胞中，使其能够稳定表达 GFP 和 ffluc 蛋白。
构建过程
选择载体：挑选合适的载体，如慢病毒载体，将 GFP 基因和 ffluc 基因插入到载体中，构建成含有目的基因的重组载体。
细胞转染：使用重组载体转染 Toledo 细胞，使目的基因进入细胞内部。常用的转染方法有化学转染法、电穿孔法、病毒转染法等，其中病毒转染法具有较高的转染效率和稳定表达的优点。
筛选稳转株：转染后，利用载体上携带的筛选标记，如抗生素抗性基因，通过添加相应的抗生素进行筛选，只有成功整合了目的基因并稳定表达的细胞才能在筛选过程中存活下来，从而获得 Toledo-GFP+ffluc 稳转株。
应用领域
肿瘤研究：可用于肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭等方面的研究。例如，通过观察 GFP 的荧光强度和分布，可以了解肿瘤细胞在体内外的生长情况和转移路径；利用 ffluc 的生物发光特性，可对肿瘤细胞进行活体成像，实时监测肿瘤的发生、发展和对治疗的反应。
药物研发：作为药物筛选的工具，通过检测 GFP 和 ffluc 的表达变化，评估药物对肿瘤细胞的作用效果，筛选出具有潜在抗肿瘤活性的药物分子。同时，也可用于研究药物的作用机制，如药物对肿瘤细胞信号通路的影响等。
细胞生物学研究：有助于研究细胞的生理过程，如细胞周期、细胞分化、细胞凋亡等。通过观察 GFP 标记的细胞，可以直观地了解细胞在不同生理状态下的形态和结构变化，以及 ffluc 报告基因的表达情况，深入探究细胞生物学机制。
培养要点
培养基选择：一般使用 RPMI-1640 培养基，并添加 10% 的优质胎牛血清（FBS）和 1% 的双抗（青霉素和链霉素），以提供细胞生长所需的营养物质和防止污染。
细胞密度控制：Toledo 细胞为悬浮生长的细胞，在培养过程中需要控制细胞密度。当细胞密度达到 80%-90% 时，应及时进行传代处理，以维持细胞的正常生长状态。一般将细胞密度维持在1×105-1×106个 /mL 左右，可以通过添加新鲜培养基或进行细胞传代来调整细胞密度。
培养条件：将细胞置于 37℃、5%CO2 的细胞培养箱中培养，保持培养环境的稳定，定期观察细胞的生长状态和形态变化，如发现细胞有异常情况，应及时采取相应的措施进行处理。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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