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HBE135-E6E7-ffluc2-GFP-Puro单克隆细胞株
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详细内容
HBE135-E6E7-ffluc2-GFP-Puro单克隆细胞株
产品名称 | HBE135-E6E7-ffluc2-GFP-Puro 单克隆细胞株 |
产品货号 | XY-H2613 |
中文名称 | ffluc2 和 GFP 双标的 HBE135-E6E7 单克隆细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)采用无限稀释法筛选单克隆细胞株; (5)单克隆细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | K-SFM + 5ng/mL hEGF + 0.05 mg/mL牛垂体提取物 + 0.005 mg/mL 胰岛素 + 500 ng/mL |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |

细胞来源与背景
HBE135-E6E7 细胞来源于正常支气管上皮,是从一位因肺鳞癌行肺叶切除术的男性患者的支气管上皮组织中获取的。原代培养的细胞在代时被含有人类乳头瘤病毒(HPV)E6E7 基因的重组逆转录病毒 LXSN16E6E7 感染,然后在含有 0.4mg/ml G418 的培养基中进行筛选,得到了 HBE135-E6E7 细胞株,该细胞株含有 HPV - 16 序列,可用于相关疾病研究。
基因编辑
ffluc2:通常是指萤火虫荧光素酶的一种变体基因,被导入细胞后,细胞会表达萤火虫荧光素酶。该酶在有底物存在时能发出生物荧光,可用于对细胞进行体外或体内的示踪、检测细胞的活性和增殖等。
GFP:即绿色荧光蛋白基因,能使细胞发出绿色荧光。通过荧光显微镜或流式细胞术等手段,可以方便地观察和识别表达 GFP 的细胞,常用于细胞定位、细胞追踪以及细胞分选等实验。
Puro:是嘌呤霉素抗性基因。在细胞培养过程中,加入嘌呤霉素可以筛选出成功导入了含有 Puro 基因的载体的细胞,只有表达 Puro 蛋白的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而保证细胞株的稳定性和纯度。
应用领域
肿瘤研究:由于 HBE135-E6E7 细胞含有 HPV - 16 的 E6E7 基因,而 HPV 感染与多种肿瘤的发生发展密切相关,因此该细胞株可用于研究 HPV 相关肿瘤的发病机制、肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移等过程。通过对 ffluc2 和 GFP 的检测,能实时监测肿瘤细胞在体内外的生长情况和分布位置。
药物研发:可作为药物筛选的模型,利用 ffluc2 和 GFP 的报告基因特性,快速评估药物对肿瘤细胞的抑制效果、细胞毒性等,为开发治疗 HPV 相关肿瘤的药物提供实验依据。同时,也可用于研究药物的作用机制,例如观察药物处理后细胞内信号通路的变化等。
基因治疗研究:作为靶细胞,探索针对 HPV 相关疾病的基因治疗策略,如研究如何通过基因编辑技术敲除 E6E7 基因,或者导入其他治疗性基因来抑制肿瘤细胞的生长。
培养条件
HBE135-E6E7 细胞一般培养在角质细胞无血清培养基中,添加 5ng/ml 人重组表皮生长因子、0.05mg/ml 牛垂体提取物、0.005mg/ml 胰岛素和 500ng/ml ,培养环境为 37℃、5% CO2 的细胞培养箱。在培养 HBE135 - E6E7 - ffluc2 - GFP - Puro 单克隆细胞株时,可能还需要在培养基中添加适量的嘌呤霉素,以维持对细胞的筛选压力,确保细胞株中目的基因的稳定表达。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:HBE135-E6E7-ffluc2-GFP-Puro单克隆细胞株,ffluc2,和,GFP,双标的,HBE135-E6E7,单克隆细胞株,,HBE135-E6E7,单克隆细胞株















