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HEK-293T-Puro+ACE2(h)·Flag稳转株
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详细内容
HEK-293T-Puro+ACE2(h)·Flag稳转株
英文名称 | HEK-293T-Puro+ACE2(h)·Flag polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2719 |
中文名称 | ACE2(h) 过表达 HEK-293T 稳转株 |
Lot number | HEK-293T-9D4P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞株背景
HEK-293 细胞:即人胚胎肾细胞 293,是衍生自人胚胎肾细胞的细胞系,具有转染效率高、易于培养等特点,极少表达细胞外配体所需的内生受体,常被用于重组蛋白表达、细胞功能研究、基因编辑等实验。
HEK-293T 细胞:是 HEK-293 细胞的一个衍生株,能表达 SV40 大 T 抗原突变变体,其转染效率更高,是逆转录病毒载体扩增的重要细胞株。
相关技术与构建
慢病毒转染技术:构建该稳转株通常采用慢病毒转染技术,将携带目的基因的慢病毒载体导入 HEK-293T 细胞。慢病毒载体可以将目的基因整合到宿主细胞的基因组中,使转染的细胞株能够长期稳定地表达目的基因。
筛选标记:“Puro” 表示嘌呤霉素抗性基因,在慢病毒转染后,利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功转染并整合了慢病毒载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而获得稳定表达目的基因的细胞株。
目的基因与蛋白表达
ACE2(h):指人血管紧张素转化酶 II,是一种 I 型整合膜蛋白,广泛分布于肺部、心脏和肾脏等组织,可调节血压和体液平衡。同时,ACE2 也是冠状病毒的功能受体,介导病毒入侵和细胞融合。
Flag 标签:是一种短肽序列,常被用于蛋白质的检测、纯化和定位等。在该稳转株中,ACE2 (h) 蛋白与 Flag 标签融合表达,便于通过抗 Flag 抗体来检测和分析 ACE2 (h) 蛋白的表达、定位及相互作用等。
应用领域
病毒学研究:可用于研究冠状病毒等病毒与 ACE2 受体的相互作用机制、病毒的入侵过程、病毒感染引起的细胞信号转导变化等,为开发抗病毒药物和疫苗提供理论基础和实验依据,如利用该稳转株与新型冠状病毒 S 蛋白重组假病毒系统,研究病毒感染机制。
药物研发:作为药物筛选的细胞模型,用于筛选能够阻断病毒与 ACE2 结合、抑制病毒感染细胞的小分子化合物、抗体或其他生物制剂等,也可用于研究药物对 ACE2 表达和功能的影响,评估药物的疗效和安全性。
细胞生物学研究:有助于深入了解 ACE2 蛋白在细胞内的定位、转运、代谢等生物学过程,以及 ACE2 与其他细胞内蛋白的相互作用网络,揭示 ACE2 在细胞生理和病理状态下的功能调控机制。
培养与维护
培养基:一般使用 MEM(含 2 mM L - 谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO₃,0.1 mM 非必需氨基酸,1.0 mM 丙酮酸钠),并添加 10% 马血清(热灭活)作为培养液。
传代:当细胞密度达到 80%-90% 时,即可进行传代培养。传代时,吸去培养液,用 0.25%(w/v)Trypsin-0.53 mM EDTA 洗一次,以去除血清,再加 2-3 毫升 Trypsin-EDTA,放在 37℃培养箱内约 5 分钟,直到细胞全部脱落,加 6-8 毫升培养液,用移液器把细胞吹散,然后以 1:2 到 1:4 的比例将适量的细胞接种到新的培养器皿中。
冻存:采用 95% 培养液 + 5% DMSO 的冻存液,将细胞冻存于液氮中,以便长期保存。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:HEK-293T-Puro+ACE2(h)·Flag稳转株,ACE2(h),过表达,HEK-293T,稳转株,HEK-293T-Puro+ACE2(h)·Flag,polyclonal,stable,cell,line















