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HEK-293T-Puro+Ga15(h)单克隆株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:21
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HEK-293T-Puro+Ga15(h)单克隆株
产品名称 | HEK-293T-Puro+Ga15(h) 单克隆细胞株 |
产品货号 | XY-H2722 |
中文名称 | Ga15(h) 过表达 HEK-293T 单克隆细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转细胞株； （4）采用无限稀释法筛选单克隆细胞株； （5）单克隆细胞株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |
1. 基本背景
细胞来源：
HEK-293T 细胞是 人胚肾细胞（HEK-293） 的衍生株，通过转染猿猴病毒 40（SV40）的大 T 抗原基因构建而来，具有高效的外源基因表达能力，广泛应用于病毒包装、蛋白生产和信号通路研究。
Ga15(h)：通常指 人源 Gα15 蛋白，属于 G 蛋白偶联受体（GPCR）信号通路中的关键分子，可激活下游效应器（如磷脂酶 C，PLC），参与细胞增殖、分化等过程。
Puro：表示该细胞株通过嘌呤霉素（Puromycin）筛选标记进行稳定转染，确保目的基因（如 Ga15）的稳定表达。
单克隆株：
通过有限稀释法或单细胞分选技术筛选获得，确保细胞群来自单个亲本细胞，具有 遗传背景均一、目的基因表达水平一致 的特点，避免多克隆细胞的异质性问题。
2. 构建流程
通常包括以下步骤：
载体构建：将人源 Gα15 基因克隆至带有嘌呤霉素抗性基因的表达载体（如 pcDNA3.1）。
转染：使用脂质体或电穿孔法将载体导入 HEK-293T 细胞。
筛选：用嘌呤霉素处理细胞，未成功整合载体的细胞死亡，存活细胞为稳定转染的单克隆前体。
单克隆化：通过有限稀释法将细胞接种至 96 孔板，筛选单个细胞克隆，扩大培养后通过 Western blot 等方法验证 Gα15 的表达水平。
3. 应用场景
GPCR 信号通路研究：
Gα15 属于非典型 Gα 蛋白，可与多种 GPCR 偶联并激活 PLC 通路。该细胞株可用于研究 GPCR 下游信号传导机制、药物与受体的相互作用等。
药物筛选：
基于 Gα15 通路的报告基因系统（如 IP3 或钙信号检测）可高通量筛选调节 GPCR 功能的小分子化合物。
病毒包装优化：
HEK-293T 是常用的病毒包装细胞（如慢病毒、腺相关病毒），稳定表达 Gα15 可能用于研究病毒感染与宿主信号通路的相互作用。
蛋白生产：
利用 HEK-293T 细胞的高效表达能力，生产重组 Gα15 蛋白或其相关复合物，用于结构生物学或功能研究。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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