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HeLa-RFP-Puro+EGFRvIIIt稳转株
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详细内容
HeLa-RFP-Puro+EGFRvIIIt稳转株
英文名称 | HeLa-RFP-Puro+EGFRvIIIt polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2699 |
中文名称 | EGFRvIIIt 过表达 HeLa 稳转株 |
Lot number | HeLa-32A6P |
细胞规格 | 1 × 106细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
产品介绍
| 1.亲株细胞系:Hela细胞系是源自一位名叫HenriettaLacks美国黑人妇女海瑞塔·拉克斯的宫颈癌细胞的细胞系。 2.过表达基因EGFRvIII:EGFRvIII是表皮生长因子受体EGFR的2~7 外显子缺失形成的突变体。据报道,约5%的人肺鳞状细胞癌(SCC)中存在EGFRvIII突变。EGFRvIII可能在人NSCLC肿瘤的发生、发展中起重要作用。吉非替尼、厄洛替尼和HKI-272等药物可抑制EGFRvIII转化细胞的增殖和EGFRvIII阳性肿瘤的生长。 3.EGFRvIIIt:EGFRvIII全长基因缺失胞内段的突变体。 4.HeLa-RFP-Puro+EGFRvIIIt 稳转株:该细胞株是由慢病毒Lenti-RFP-Puro+EGFR vIIIt转导HeLa细胞经嘌呤霉素筛选构建而成,该细胞能在体外稳定过表达EGFRvIIIt和RFP。 5.细胞株质检:该稳转株在本库通过支原体检测,其亲代细胞在本库通过STR鉴定。 6.应用领域:CART的免疫治疗靶点。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
传代方法 | 建议1:2 ~ 1:3传代,每2 ~ 3天传代或换液1次。 |
运输条件 | 活细胞常温运输或冻存细胞干冰运输。 |

名称解析
HeLa:代表该细胞株的来源,即人宫颈癌细胞系,HeLa 细胞具有无限增殖的特性,在细胞生物学研究中被广泛应用。
RFP:即红色荧光蛋白(Red Fluorescent Protein),是一种能够发出红色荧光的蛋白质,常被用作报告基因。在 HeLa-RFP-Puro+EGFRvIIIt 稳转株中,RFP 的表达可以帮助研究人员通过荧光显微镜等设备直观地观察细胞的位置、形态以及细胞内的各种生理过程。
Puro:指嘌呤霉素(Puromycin),是一种用于筛选稳定转染细胞的抗生素。在构建稳转株的过程中,只有成功导入了含有 RFP 基因和相关抗性基因的载体的细胞,才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并继续增殖,从而实现稳定转染细胞的筛选。
EGFRvIIIt:EGFR 指表皮生长因子受体,EGFRvIIIt 是 EGFR 的一种突变体,即 Ⅲ 型缺失突变体,在许多肿瘤细胞中高表达,与肿瘤的发生、发展、侵袭和转移等过程密切相关。HeLa-RFP-Puro+EGFRvIIIt 稳转株中表达 EGFRvIIIt,可用于研究该突变体在肿瘤细胞中的功能和作用机制。
构建方法
载体构建:首先需要构建含有 RFP 基因、嘌呤霉素抗性基因以及 EGFRvIIIt 基因的表达载体。通常会选择合适的质粒或病毒载体,如慢病毒载体,将这些基因插入到载体的特定位置,使其能够在细胞中正确表达。
细胞转染或感染:将构建好的载体通过转染或感染的方法导入 HeLa 细胞中。转染方法包括化学转染试剂介导的转染、电转染等;感染方法则主要适用于病毒载体,如慢病毒感染,利用病毒的感染特性将基因导入细胞。
筛选与鉴定:在含有嘌呤霉素的培养基中培养转染或感染后的细胞,只有成功导入载体并表达嘌呤霉素抗性基因的细胞才能存活下来。经过一段时间的筛选,得到稳定表达 RFP 和 EGFRvIIIt 的细胞株。然后通过荧光显微镜观察 RFP 的表达情况,以及采用 Western blotting、PCR 等方法检测 EGFRvIIIt 的表达水平,对稳转株进行鉴定。
应用领域
肿瘤生物学研究:可用于研究 EGFRvIIIt 突变体在肿瘤细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等过程中的作用机制,了解肿瘤的发生发展规律。例如,通过观察稳转株在不同条件下的生长情况,研究 EGFRvIIIt 对肿瘤细胞周期的影响;或者通过细胞迁移和侵袭实验,探究 EGFRvIIIt 对肿瘤细胞转移能力的调控作用。
药物研发:作为药物筛选的模型,用于筛选针对 EGFRvIIIt 的小分子抑制剂、抗体药物或其他新型治疗药物。可以在细胞水平上检测药物对稳转株的生长抑制作用、诱导凋亡作用以及对相关信号通路的影响,为肿瘤治疗药物的研发提供重要的实验依据。
基因治疗研究:可用于评估针对 EGFRvIIIt 的基因治疗策略的有效性和安全性。例如,研究 RNA 干扰技术对 EGFRvIIIt 表达的抑制效果,或者探索基因编辑技术如 CRISPR/Cas9 在敲除 EGFRvIIIt 基因方面的应用,为肿瘤的基因治疗提供实验基础。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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