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U87 MG-GFP-Puro+EGFRvIIIt稳转株
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详细内容
U87 MG-GFP-Puro+EGFRvIIIt稳转株
英文名称 | U87 MG-GFP-Puro+EGFRvIIIt polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2703 |
中文名称 | EGFRvIIIt 过表达 U87 MG 稳转株 |
Lot number | U87 MG-32A5P |
细胞规格 | 1 × 106细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
产品介绍
| 1.亲株细胞系:U87由Ponten J等建立,源于恶性神经胶质瘤。 2.过表达基因EGFRvIII:EGFRvIII是表皮生长因子受体EGFR的2~7 外显子缺失形成的突变体。据报道,约5%的人肺鳞状细胞癌(SCC)中存在EGFRvIII突变。EGFRvIII可能在人NSCLC肿瘤的发生、发展中起重要作用。吉非替尼、厄洛替尼和HKI-272等药物可抑制EGFRvIII转化细胞的增殖和EGFRvIII阳性肿瘤的生长。 3.EGFRvIIIt:EGFRvIII全长基因缺失胞内段的突变体。 4.U87 MG-GFP-Puro+EGFRvIIIt 稳转株:该细胞株是由慢病毒Lenti-GFP-Puro+EGFR vIIIt转导U87 MG细胞经嘌呤霉素筛选构建而成,该细胞能在体外稳定过表达EGFRvIIIt和GFP。 5.细胞株质检:该稳转株在本库通过支原体检测,其亲代细胞在本库通过STR鉴定。 6.应用领域:CART的免疫治疗靶点。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
传代方法 | 建议1 : 2 ~ 1 : 3传代,每2 ~ 3天传代或换液1次。 |
运输条件 | 活细胞常温运输或冻存细胞干冰运输。 |

细胞来源及背景
亲本细胞系:U87 MG 细胞是人恶性胶质瘤细胞系,在肿瘤研究,尤其是胶质瘤相关研究中应用广泛。
基因改造及特性
GFP 表达:细胞中稳定整合了绿色荧光蛋白(GFP)基因,能稳定表达 GFP。GFP 作为报告基因,使得细胞在蓝光激发下可发出绿色荧光,便于通过荧光显微镜、流式细胞术等方法进行观察、分选和追踪,可应用于细胞迁移实验、体内成像等研究,简化检测手段,能实时监控肿瘤大小和分布等。
Puromycin 抗性:具有嘌呤霉素(Puromycin)抗性。在构建稳转株过程中,利用这一特性,在培养基中添加嘌呤霉素来筛选成功转入目标基因的细胞,只有整合了相关基因并表达出嘌呤霉素抗性蛋白的细胞才能存活,从而获得稳定转染的细胞株。
EGFRvIII 表达:表达表皮生长因子受体 III 型突变体(EGFRvIII)。EGFRvIII 是 EGFR 的一种突变体,其胞外区 37 外显子产生框内缺失,只在肿瘤细胞中出现,正常组织中不表达,是肿瘤治疗的潜在靶标。该稳转株稳定表达 EGFRvIII,可为胶质瘤发生发展的分子机制研究以及以 EGFRvIII 为靶点的抗肿瘤治疗及其机制研究提供重要的细胞模型,例如用于筛选针对 EGFRvIII 及其下游信号分子的抑制剂等。
构建方法(通常情况)
一般采用慢病毒感染等方法构建。先将含有 GFP 基因和 EGFRvIII 基因的慢病毒载体准备好,然后感染 U87 MG 细胞。感染后在培养基中加入嘌呤霉素进行筛选,挑出阳性克隆,再经过克隆化培养和鉴定(如 RT-PCR 检测基因 mRNA 水平、Western blot 检测蛋白表达水平、细胞免疫荧光染色观察蛋白定位等),最终获得稳定表达 GFP 和 EGFRvIII 且具有嘌呤霉素抗性的 U87 MG-GFP-Puro+EGFRvIIIt 稳转株。
培养条件(示例,实际可能因实验室等因素略有差异)
通常在含有 10% 胎牛血清(FBS)的 DMEM 培养基中,于 37°C、5%CO2 的培养箱中培养,且培养基中需添加适量的嘌呤霉素(如 3 µg/ml,具体浓度需根据实验优化)以维持其抗性筛选压力和稳定表达特性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:U87,MG-GFP-Puro+EGFRvIIIt稳转株,EGFRvIIIt,过表达,U87,MG,稳转株,U87,MG-GFP-Puro+EGFRvIIIt,polyclonal,stable,cell,line















