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活细菌/死细菌双染试剂盒(DMAO/PI)
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详细内容
活细菌/死细菌双染试剂盒(DMAO/PI)
产品货号:XY9-41276
产品规格及价格:500T/1000元;1000T/1900元
产品简介:
活 细 菌/死 细 菌 染 色 试 剂 盒 (DMAO/PI) 是 采 用DMAO/PI绿色-红色荧光探针双染细菌的方法染色活细菌和死细菌。细菌细胞活性取决于其代谢特征或膜完整性。但是依赖于代谢特征的检测方法通常只适用于部分细胞类型。评估细胞膜完整性的方法具有更高的灵敏度和更普遍的适用性。
活细菌/死细菌染色试剂盒利用细菌细胞膜的完整性差异,可以可靠地进行染色并在几分钟内定量区分活细菌和死细菌。本试剂盒中的DMAO绿色荧光的细菌核酸探针,能透过活细菌的完整结构的质膜,既能染色活细菌,也能染色死细菌。DMAO对革兰氏阳性和阴性细菌均适用,具有500 / 526 nm的最大激发/发射波长。
保存温度
2-8℃ 避光保存
注意事项
1.染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2. 染色液A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4. 试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
荧光酶标仪/荧光光度计/激光共聚焦/流式细胞仪/荧光显微镜等
适用样本
细菌
产品应用
荧光酶标仪/荧光光度计/激光共聚焦/流式细胞仪
仪器准备
1. 荧光酶标仪/荧光光度计/激光共聚焦/流式细胞仪/荧光显微镜等
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
试剂准备
0.85% NaCl溶液
耗材准备
1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 黑色透明底96孔细胞培养板
使用注意事项
1. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 染色液A为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。融解后离心至管底部再打开螺旋盖。
3. 试剂A为了便于观察防止误操作导致损失,在试剂盒中时是采用透明管包装,收到后可以离心移入干燥黑色避光密封管或者用铝箔包裹避光。
4. 建议收到产品后,根据单次使用量,对DMAO母液进行小量分装,每次使用一管,试剂-20℃避光冻存,一年稳定。
5. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
6. 所有染色操作在塑料容器进行,不要在玻璃容器染色。
7. 以下为进行活死细菌染色观察的参考步骤,可以根据文献的方法进行调整。如果有必要,也可以设定对照活细菌和死细菌,进行定量检测。可以参考附录中的对照细胞设定方法,也可以根据需要自己设定对照和检测方法。
8. 标记的条件因细菌种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细菌类型、细菌的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
9. 流式检测时建议添加直径6.0 µm微球标准品。
10. 细菌类型会明显影响红色荧光的量。
使用方法
染色工作液的配制:
根据样品数按下列比例配制染色工作液。
用37℃培养箱预热0.85% NaCl溶液将DMAO荧光染料进行500倍稀释,将PI进行100-500倍稀释,配制成染色工作液。
例如:
每10 ml 0.85% NaCl溶液中加入20 µl染色液A,充分混匀,即成染色工作液A。
每10 ml 0.85% NaCl溶液中加入20-100 µl染色液B,充分混匀,即成染色工作液B。
细菌染色:
1. 收集样本细菌,用0.85% NaCl溶液洗涤细胞3次。
2. 用100 µl-200 µl染色工作液将细菌重悬。
3. 在室温避光孵育15分钟。
4. 用0.85% NaCl溶液洗涤细菌一次。
5. 用适量0.85% NaCl溶液重悬细菌。
6. 将5 µl菌液滴加到载玻片,盖上盖玻片,油镜观察。
7. 用荧光显微镜观察。激发波长为488 nm,最大发射波长为520 nm和635 nm。
结果分析 :
可以在Ex / Em = 488 / 520 nm(FITC滤光器组)和540 / 635 nm(TRITC滤光器组)下荧光测量染色细胞,分别用于活细菌和死细菌。
荧光显微镜下,使用490±10 nm波长激发,活细菌为黄绿色,死细菌为红色。
用545 nm波长激发,仅能够看到红色的死细菌。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:活细菌/死细菌双染,DMAO/PI,活细菌/死细菌双染试剂盒(DMAO/PI)















