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焦亡检测试剂盒(pyroptosis)-比色法
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详细内容
焦亡检测试剂盒(pyroptosis)-比色法
产品货号:XY9-48623
产品规格及价格:50T/2300元;100T/3200元
产品简介:
基于比色法的细胞焦亡检测主要通过两种路径:检测炎症性 Caspase(如 Caspase-1/4/5/11)活性(pNA 底物在 405 nm 吸光),或检测细胞膜破裂释放的 LDH(甲臜产物在 490/450 nm 读取)。
适用场景与优缺点
优点:无需荧光设备,酶标仪 / 分光光度计即可;操作简单、成本友好。
局限:灵敏度低于荧光法,需较强诱导或较高丰度信号;样本内源性物质可能干扰吸光读数
量以提升信号。
想测膜破裂 / 死亡终点:选 LDH 释放,与 Caspase 活性联用可增强证据链(机制 + 结果)。
快速实验流程(以 Caspase-1/4 比色法为例)
准备:裂解细胞 / 组织,离心取上清;配制 405 nm 校准曲线(pNA 标准品)。
反应:样本 + 反应缓冲液 + 特异性底物(如 LEVD‑pNA),37℃ 孵育 1–2 h(可延长至过夜)。
读数:酶标仪 / 分光光度计读取 405 nm;计算 ΔA=A 样品−A 空白,代入标准曲线获得 pNA 生成量,换算酶活性 / 倍数变化。
质控:设置阳性对照(如尼日利亚菌素)、阴性对照与空白;必要时稀释样本以确保线性。
联用与验证建议
焦亡判定常需 “机制 + 结果” 双证据:Caspase-1/4/5 活性 + LDH 释放,或结合 GSDMD 切割与形态学观察更佳。
同一样本可同时测 Caspase-1 与 Caspase-4,提高焦亡证据强度。
常见问题与对策
信号弱:增加样本量 / 细胞数、延长孵育、提高诱导强度或更换更强诱导剂。
背景高:优化裂解与离心条件、设置充分空白与对照、必要时稀释样本。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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