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Annexin V-EGFP / 7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒
价格：￥ 20T/900元；50T/1300元；100T/2000元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:06:33
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Annexin V-EGFP / 7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒
产品货号：XY9-41022
产品规格及价格：20T/900元；50T/1300元；100T/2000元
产品简介：
细胞凋亡是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面起着十分重要的作用。
在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。在体内，巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的 PS 从而将这些程序性死亡的细胞清除，因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应，而在细胞坏死的过程中则常常伴随着炎症反应。
AnnexinⅤ 是一种分子量为 35-36kD 的 Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的 PS 高亲和力特异性结合。PS 外翻发生在细胞核破裂，DNA 片段化以及凋亡相关蛋白出现之前，这使得 Annexin V 与 PS 的结合成为凋亡早期的一种重要检测标志事件
产品应用：
1.流式细胞仪
2.激光共聚焦
3.荧光显微镜
产品特点：
1.方便：可用流式细胞仪或荧光显微镜检测；
2.快速：1 小时内即可完成实验；
3.准确：能准确区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞，并计数各群细胞的比例。
使用方法：
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体损失导致试剂量不够用。
2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。离心力在不损失细胞的前提下尽可能小，重悬细胞是动作要轻柔，避免多次反复的激烈吹打。不用涡旋振荡器。
3.Annexin V-FITC（等）和 Propidium iodide（等）是光敏物质，在操作时请注意避光，尽量减少它们暴露在光下的时间。有必要时可以使用带盖子的冰盒或铝箔纸避光。标记后将细胞保持在避光环境中。移液过程中短暂暴露在光线下（<30 秒）是可以接受的。
4.由于细胞凋亡是一个快速和动态的过程，因此在染色后立即进行分析。
5.使用 Annexin V-FITC（等） 试剂盒检测凋亡需要针对活细胞。不要固定细胞，固定操作会对结果产生干扰。
样品染色：
1. 离心收集悬浮细胞。离心机约 300×g 力，2-8°C，离心时间 5 分钟，弃培养基。
2. 用冷 PBS 洗涤细胞两次。
3. 用 400 µl 1X Annexin V 结合液重新悬浮细胞，浓度大约为 1×106 cells/ml。
4. 在细胞悬浮液中加入 5 µl Annexin V-EGFP 染色液，轻轻混匀后于 2-8°C 避光条件下孵育 15 分。
5. 加入 5-10 µl 7-AAD 染色液后轻轻混匀于 2-8°C 避光条件下孵育 2-5 分钟。
6. 立即用流式细胞仪或荧光显微镜检测。
常见问题分析：
实验过程中 Annexin V 染不上色或阳性率偏低。可能的原因如下：
1. 用于检测的流式细胞仪/显微镜设置不当。调整使用正确的仪器设置。
2. 确定实验中的诱导剂是否能产生凋亡。可通过设定确切凋亡诱导效果的阳性药物对照来排除这一情况。
3. 细胞未启动凋亡。重新确定诱导后凋亡启动的时间点（时程实验）。
4. 细胞数量偏少。增加细胞数量。
5. 贴壁细胞消化不当。Annexin V 跟 PS 的结合需要 Ca2+离子，结合液中含有 Ca2+，EDTA的消化会影响染色，建议使用无 EDTA 的胰酶，或者消化后用 PBS 洗涤干净。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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