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Caspase 10 活性检测试剂盒
价格：￥ 20T/700元；50T/1300元；100T/2300元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:46:42
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详细内容
Caspase 10 活性检测试剂盒
产品货号：XY9-4112
产品规格及价格：20T/700元；50T/1300元；100T/2300元
产品简介：
Caspase 10 活性检测试剂盒(Caspase 10 Activity Assay Kit)是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中Caspase 10酶活性或纯化的Caspase 10酶活性的试剂盒。
Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-10是近年来发现的一类含有死亡效应结构域(dead-effector domain,DED)的蛋白酶,在结构上与Caspase家族的另一成员Caspase-8有很高的同源性，通过形成死亡诱导信号复合物(death induced signaling complex,DISC)，激活自身蛋白酶活性，传递凋亡信号。Caspase-10的功能异常与许多疾病的发生有着密切的关系。
Caspase-10比色法检测试剂盒提供了一种简单方便的方法检测能识别AEVD序列的 caspases活性。本检测技术基于酶切标记了的底物AEVD -对硝基苯胺（pNA）之后对发光基团pNA进行光谱光量测量。pNA发射的光谱可以被分光光度计或者微量滴定板读数器在400-405 nm出定量检测。
本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100µl的分光光度检测杯检测，可用于培养细胞或新鲜组织样本的caspase-10检测。
还可以提供AFC、R110，AMC等荧光标记的Caspase-10 活性检测试剂盒（相关产品BB-41122）。荧光法检测的灵敏度远高于分光光度法，有荧光检测条件者尽可能选择荧光法的检测试剂盒。没有荧光检测条件，可以选择的比色法Caspase-10活性检测试剂盒，需要确保样品中Caspase-10活化程度足够高。
产品应用：
1.酶标仪
2.分光光度计
使用方法：
一、 裂解缓冲液和检测缓冲液配制
根据待测样品数准备裂解缓冲液和检测缓冲液，每 1ml 缓冲液中加入 10µl DTT。
充分混匀置冰上备用。
二、 样品处理
A． 细胞样品
1. 收集 2-5×106 个细胞，在 4℃，500×g 条件下离心 2-3 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 在细胞中加入 50µl 冷的裂解缓冲液，高速涡旋振荡 15 秒。
4. 置冰上持续振荡 15-30 分钟。
5. 在 4℃，10000×g 条件下离心 15 分钟。
6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
B． 组织样品
1. 取适量组织样本剪碎，按照 50mg/100µl 冷的裂解缓冲液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体（或用液氮研磨），冰上振荡 15-30 分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
1. 在 4℃，10000×g 条件下离心 5 分钟。
2. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
三、 对上述处理过的上清进行蛋白定量。
四、 Caspase-10 活性检测
1、 取 50µl 大约含 100-200ug 蛋白的裂解上清，加入 50µl 检测缓冲液。
2、 再加入 10µl caspase-10 底物，充分混匀。在 37℃下避光反应 1-4 小时，有黄色颜色产生即可进行检测，如果颜色变化不明显，时间可以延长，甚至孵育过夜。部分样品中激活的 caspase-10 水平较低，颜色变化不明显，直接上机检测，与对照组样品产品变化即可。
3、 测定 A405nm 或 A400nm。
4、 根据凋亡诱导的细胞的吸光值与空白对照细胞的吸光值的比值计算相对的 Caspase-10 活性程度。
常见问题分析：
比色法 caspase-10 活性检测方法常见的问题主要为测得的 OD 值偏低，颜色变化不明显，无法显示与对照组细胞的差异，其可能的原因主要集中在以下几个方面：
1、 样品上样量不够：本方法检测需要的细胞数量须在 3×106 以上，或者新鲜组织 50mg 以上，每次反应的蛋白量需要在 100ug 以上。如果量不够，请增加细胞或组织的量。
2、 样本不新鲜：使用新鲜的细胞或组织样本。
3、 样品裂解不够充分：细胞或组织需要进行充分裂解，可以加入适当的蛋白酶抑制剂混合物裂解，裂解后应无明显大量的沉淀，以保证有效获得蛋白。
4、 样品中激活的 caspase-10 水平偏低：首先确认模型的凋亡现象是否明显，以及根据文献和其他验证方法确认该凋亡是否激活 caspase-10。
5、 检测时间点的选择是否合适：不论哪种通路的凋亡，需要在 caspase-10 被有效激活并达到相应活化程度后的一定时间范围内检测，过早或过晚均不合适。
6、 不适合本方法检测：某些凋亡诱导剂诱导的凋亡可能是非依赖于 caspase-10 活化的机制，此种情况时利用本试剂盒检测 caspase-10 无明显变化，需要考虑凋亡机制的其他通路。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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