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细胞粘附检测试剂盒(红色荧光)
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详细内容
细胞粘附检测试剂盒(红色荧光)
产品货号:XY9-48127
产品规格及价格:100T/3000元;500T/4300元
产品简介:
细胞粘附是指细胞与细胞之间及细胞与细胞外基质之间的粘附。细胞粘附是细胞维持形态结构与功能的生物现象,是细胞间信息交流的一种形式。细胞粘附对于细胞的生长和存活以及与其他细胞的通讯至关重要。细胞粘附过程涉及一系列生物事件,例如细胞骨架的三维重组,细胞中的生化反应以及细胞表面分子的变化。细胞信息交流的可溶递质称细胞粘附分子(cell adhesion molecule,CAM)。细胞粘附分子是参与细胞与细胞之间及细胞与细胞外基质之间相互作用的分子。 是一类独立的分子结构,是通过识别与其粘附的特异性受体而发生相互间的粘附现象。
细胞的生长、发育、分化及代谢状态和外界细胞因子、炎症介质反应等均可以影响细胞粘附,细胞粘附也可能是肿瘤细胞易发生浸润、转移等现象的分子基础。
系列细胞粘附检测试剂盒含全套试剂,通过活细胞红色荧光探针C52染色粘附的活细胞数量来反应细胞的粘附能力变化。最大激发和发射波长分别为560 nm和590 nm。
本试剂盒采用优化的包被液配方,对于细胞行为、细胞活性影响很小,对于操作者的经验要求不高,实验稳定性高,重复性好。
本试剂盒可用于评估癌细胞的转移能力、检测各种干预措施(如药物处理、养分缺失、缺氧或遗传基因操控、病毒感染等)如何影响细胞粘附。所用检测试剂无细胞毒性,不影响细胞功能,完全不干扰细胞粘附过程。
本试剂盒含有包被液,使用方便快速,可以进行高通量检测。本试剂盒使用比色法进行检测,如果需要荧光法检测的。
本试剂盒适合进行常规的总体粘附性能的检测。试剂盒含有包被剂,如果需要不含包被剂的产品。

使用方法:
包被:
1. 96孔板每孔加入50 µl -100 µl包被液。
2. 将培养板置2-8°C过夜。
3. 移除包被液。
4. 干燥培养器皿。室温下置通风橱内风干数分钟即可完成干燥,至肉眼观察完全干燥。
5. 用洗涤液洗涤1-3次。
细胞接种:
1. 待测定细胞处理好后,用胰酶消化,PBS洗涤,然后用相应培养基重悬,制成细胞悬液。
2. 按5×104细胞/孔接种96孔板,建议设3-5个复孔。同时设立对照组,即孵育后不弃上清组。
3. 放37℃培养箱孵育30分钟-2小时。
4. 取出培养板,吸弃培养基。
5. 然后用相应的培养基洗涤2-3次。
6. 用洗涤液洗涤一次。
7. 每孔加入100 µl新鲜培养基。
粘附率检测:
1. 96孔板每孔加入10 µl细胞染色液B工作液,充分混匀。
2. 37℃避光孵育1-12小时。
3. 用荧光酶标仪/激光共聚焦检测结果。最大激发波长560 nm,最大发射波长分别为590 nm。
4. 细胞粘附率计算。
将各测试孔的荧光强度值减去空白孔(未加细胞孔)荧光强度值。各重复孔的荧光强度值取平均数。
细胞粘附率% =((F待测细胞 - F空白)/(F对照细胞 - F空白))×100
使用注意事项
1. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体损失导致试剂量不够用。
2. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。离心力在不损失细胞的前提下尽可能小,重悬细胞是动作要轻柔,避免多次反复的激烈吹打。不用涡旋振荡器。
3. 染色培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。一般情况下,白细胞较难染色,因此需要较长的培养时间。培养时间一般为1- 4小时,但在培养30分钟左右即可取出肉眼观察染色程度 (根据细胞种类而定,需要摸索一下条件)。当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100 µl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100 µl 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入染色液B。
4. 有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加染色液B试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,会干扰O.D值读数。
5. OD值在0.4-2.0之间均可,最大值控制在接近1.0左右为宜,小于0.4或大于2.0请调整接种量和培养时间。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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