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上海信裕生物科技有限公司 主营产品:ELISA试剂盒价格,检测试剂盒,白介素试剂盒,试剂盒价格,重组蛋白,单克隆抗体,多克隆抗体

第11年

当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生物制剂 > 蛋白相关制品 > 上海信裕生物科技有限公司 > 产品展示 > 蛋白质生物学 > 总蛋白提取试剂盒(蛋白相互作用适用(Pull-down、co-IP等))

总蛋白提取试剂盒(蛋白相互作用适用(Pull-down、co-IP等))

价格:¥ 50T/700元;100T/1100元

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/15 11:06:33

产品摘要:总蛋白提取试剂盒(蛋白相互作用适用(Pull-down、co-IP等))适用于从各种原代或传代培养动物细胞和各种动物实体组织,如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织样品中提取总蛋白。配合其他试剂时,也可以用于植物、细菌、真菌、酵母等样品的总蛋白提取。

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产品完善度: 访问次数:582

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旗舰版网址:http://www.xybio-sh.com

详细内容

总蛋白提取试剂盒(蛋白相互作用适用(Pull-down、co-IP等))

产品货号:XY9-31012

产品规格及价格:50T/700元;100T/1100元

产品简介:

总蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种原代或传代培养动物细胞和各种动物实体组织,如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织样品中提取总蛋白。配合其他试剂时,也可以用于植物、细菌、真菌、酵母等样品的总蛋白提取。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜组份,包括细胞质膜、核膜和各种细胞器膜。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于Pull-down、IP等蛋白相互作用研究,也可以用于WB、蛋白质电泳、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白,下游应用范围广,提取液裂解细胞的能力较温和,需要根据实际样本情况优化裂解时间。
本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分,不可直接用于2D电泳,如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳,请使用其他货号的试剂盒)。也可以将样品除盐后再用于2D电泳,用脱盐柱脱盐处理)。
本试剂盒按每个处理样本50 mg细胞/组织计(大约50 µl细胞沉淀体积),如果需要处理大量的细胞/组织,将提取液按细胞体积的1:10加入细胞沉淀即可。每个50T试剂盒大约可以提取2.5 g细胞/组织样本的总蛋白。根据不同的细胞类型,100 mg细胞沉淀物(107个细胞)的总蛋白质产量大约为6mg左右。

产品应用:

Pull-down, co-IP, IP,

WB,ELISA,EMSA,purification 等

产品特点:

1.使用方便,从细胞,组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。

2.提取过程简单方便,将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。

3.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。

4.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。

5.总蛋白提取液含多种有效成分,可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白,又可结合释出的蛋白防止沉淀。
6.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64,每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

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使用方法:

旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。

蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。

实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。

如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测,提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂,注意提取过程保持低温操作,缩短离心时间。

Western Blot 实验内参可以选用 beta-actin、GAPDH、Tubulin。

离心机转速有相对离心力(RCF,×g)和每分钟转速(RPM,r/min)两种表示方式,有些离心机设置有RPM 和×g 显示切换,但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算:g=r×1.118×10-5×rpm2 (r 为有效离心半径,即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度,单位为厘米) 例如: 转速为3000rpm,有效离心半径为 10 cm,则相对离心力(RCF,×g)为=10×1.118×10-5×30002=1006.2(×g)。

细胞样本总蛋白提取:

悬浮细胞蛋白提取:

1. 提取液准备:

每 500 µl 冷的总蛋白提取液中加入 2 µl 蛋白酶抑制剂混合物和 2 µl 磷酸酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。

2. 取 5×106 个细胞,在 4℃,2500×g 条件下离心 5 分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。

3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。

4. 每 5×106 -1×107 个细胞(大约 50 mg 细胞/50 µl 细胞沉淀体积)中加入 500 µl 冷的总蛋白提取液,吹打混匀后,在 4℃条件下振荡 20-30 分钟,至细胞充分裂解,无明显细胞沉淀。

5. 在 4℃,12000×g 条件下离心 15 分钟。

6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到总蛋白。

7. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

贴壁细胞蛋白提取:

1. 提取液准备:

每 500 µl 冷的总蛋白提取液中加入 2 µl 蛋白酶抑制剂混合物和 2 µl 磷酸酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。

2. 小心吸取贴壁细胞的培养液。

3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干 PBS。

4. 加入适量冷的总蛋白提取液,振荡 15-30 分钟,至细胞充分裂解,用细胞刮刀刮一遍,将裂解液吸入另一干净离心管。

5. 在 4℃,12000×g 条件下离心 15 分钟。

6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得到总蛋白。

7. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

组织样本总蛋白提取:

1. 提取液准备:

每 500 µl 冷的总蛋白提取液中加入 2 µl 蛋白酶抑制剂混合物和 2 µl 磷酸酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。

2. 取 50-100mg 组织样本,用 PBS 洗干净,然后用手术剪刀尽可能剪碎,加入 500 µl 总蛋白提取液,用组织匀浆器/匀浆机匀浆至无明显肉眼可见固体。

3. 将组织匀浆吸入一预冷的干净离心管中,在 4℃条件下振荡 10-20 分钟。

4. 在 4℃,10000-14000×g 条件下离心 15 分钟。

5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得到总蛋白。

6. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

常见问题分析:

1.蛋白浓度低?

处理部分组织样本时可能没有裂解完全,导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂 A 的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。

2.细胞裂解速度慢?为了充分保证提取得到的蛋白的活性,提取液采用独特的保护蛋白的配方,裂解能力温和,

下游应用范围广。适当延长裂解的时间即可。

3.用什么方法定量蛋白?

建议用 BCA 法。不适合用 Bradford 法,因为试剂 A 中含有干扰 Bradford 法的组份,导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用 Bradford 法定量。

4.提取时出现胶状沉淀?

蛋白提取液处理产物中有时会出现少量透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组 DNA 等的复合物。不检测和基因组 DNA 结合特别紧密的特定蛋白的情况下,可以直接离心取上清进行后续实验即可;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理,300w/10 秒间隔 10 秒,超声 3 分钟,随后离心取上清用于后续实验。检测一些常见的转录因子,例如 NF-kappaB、p53 等时,不必进行超声处理。

5.提取的蛋白具有活性吗?

本试剂盒不含有离子型去垢剂组份,不破坏蛋白的结构,没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏,蛋白均保持其天然构象和活性。

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

热门标签:总蛋白提取试剂盒,Pull-down,co-IP等,总蛋白提取试剂盒(蛋白相互作用适用(Pull-down,co-IP等))

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